Kit de prueba de ELISA de micoplasma Gallisepticum (MG) de anticuerpos Diagnóstico de la enfermedad del pollo

El equipo de ensayo de ELISA de anticuerpos Mycoplasma Gallisepticum (MG)

No de catálogo LSY-30026

1. Uso

Este kit se utiliza para detectar anticuerpos contra Mycoplasma Gallisepticum (MG) en suero de pollo,para evaluar la condición de los anticuerpos por la vacuna Mycoplasma Gallisepticum (MG) en las granjas de pollos y ayudar al diagnóstico de pollos infectados serológicamente.

2Principio.

El kit de ELISA de anticuerpos contra Mycoplasma Gallisepticum ((MG) se basa en un análisis inmunológico enzimático indirecto (ELISA indirecto).El antígeno se recubre en placas.Cuando una muestra de suero contiene anticuerpos específicos contra el virusLavar los anticuerpos no unidos y otros componentes. Luego agregar un conjugado de enzima específica. Después de la incubación y el lavado, agregar el sustrato TMB.Una reacción colorimétrica aparecerá, medido por un espectrofotómetro (450 nm).

3.Reactivos

4.Materiales requeridos pero no suministrados

1) Micropipettores y puntas desechables: 0,5 μL~10 μL,10 μL~100 μL,100 μL~1000 μL

2) Las puntas desechables

3) Incubadora a 37 °C

4) Botella de medición: 500 ml

5) Lector de microplacas de 96 pozos

6) Agua destilada o agua desionizada

7) Lavadora de botellas o microplacas

5Preparación de las muestras

Tomar sangre animal entera, hacer suero de acuerdo con los métodos regulares, el suero debe ser transparente, no tienen hemólisis.

6. Preparación del tampón de lavado

Antes de usar, devuelva el tampón de lavado a temperatura ambiente, si hay cristales salados, agite para que los cristales se disuelvan, luego use agua destilada o agua desionizada para diluirlo 10 veces.El tampón de lavado diluido puede conservarse durante una semana a 4 °C.

7. Dilución de la muestra

En la placa de dilución del suero, diluir el suero a 1:101 con dilución de la muestra (por ejemplo: 200μL de dilución de la muestra + 2μL de suero))

Nota: el suero de control negativo y el suero de control positivo no necesitan diluirse.Agitar uniformemente la muestra antes de agregarla.

8. Notas

1) Todos los reactivos deben ajustarse a temperatura ambiente y agitarse uniformemente antes de usar, conservarse a 2-8 °C después de usar.

2) No intercambiar los reactivos de los kits de diferentes números de lotes para su uso.

3) El sustrato y la solución de parada pueden ser excitantes para la piel y los ojos, tenga cuidado al usar.

4) No exponga el TMB (Substrato B) a la luz y evite su contacto con antioxidantes.

5) Los pozos deben evitar la humedad o el contacto con el agua después de su apertura (Ponga la microplaca no utilizada de nuevo en el saco con deshidratador a 2 ~ 8 °C pronto)

6) Tratar todos los desechos razonablemente antes de verterlos para evitar la contaminación.

7) Siga estrictamente las instrucciones para obtener el mejor resultado. Todos los procedimientos, incluida la pipetación, el tiempo y el lavado, etc., deben ser precisos.

8) La placa de dilución del suero es desechable, no se utilice por segunda vez; su volumen máximo es de 300 μL/pozo.

9Procedimiento ELISA

1) Se toma una microplaca pre-revestida (se puede abrir durante varios usos según la cantidad de muestra), se añade 100 μL de suero diluido a un pozo, mientras se pone 1 pozo para el suero de control negativo,Serum de control positivo y pozos de control en blanco por separado. añadir 100 μl de suero de control negativo/positivo a sus pozos, añadir sólo 100 μl de dilución de la muestra en el pozo de control en blanco. agitar suavemente, no desbordar,Incubación a los 37 años°Cdurante 30 minutos.

2) Derramar el líquido de los pozos, añadir solución de lavado diluida a cada pozo completamente ((aproximadamente 350μL), estático durante 1 min, verter.

3) Añadir 100μL de solución conjugada de enzimas a cada pozo, agitar suavemente yIncubación a los 37 años°Cdurante 30 minutos.

4) Repita el paso 2 (lavado).

5) Añadir 50 μL de sustrato A y luego de sustrato B (50 μL) a cada pozo, mezclar adecuadamente,reaccionar durante 10 minutos en la oscuridad a 37°Cen la oscuridad.

6. Se añadirán 50 μl de solución de retención en cada pozo y se medirá el resultado en 10 minutos.

10Resultados

Establecer cero en el pozo de control en blanco y probar el valor OD450nm (630 nm como referencia) en el lector de microplacas.Las condiciones para que el ensayo sea tenable son que el valor medio de OD450nm de los pozos de control positivo sea igual o superior a 0..4, y el valor promedio de los pozos de control negativo es inferior a 0.15Si el ensayo es inválido, el procedimiento de operación es escéptico, ejecutar el ensayo de nuevo y observar cuidadosamente todos los reactivos.

Si el valor de A450 de la muestra es superior a 0,25+ absorbancia del control negativo, se considera positivo; y si inferior a 0,25+ absorbancia del control negativo, negativo.Si la absorbancia del control negativo es inferior a 0.05, se calculará como 0.05

Especificaciones:96 pozos por equipo.

Fecha de caducidad:- 12 meses. - ¿Qué es eso?

El almacenamiento:Almacenamiento a 2-8°C, en la oscuridad.

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