LSY-30037 Diagnóstico de anticuerpos contra la fiebre aftosa porcina de tipo A 96*2 pozos/kit Kit de prueba del virus de la fiebre aftosa porcina (fmdv)

 Anticorpos contra la fiebre aftosa porcina de tipo AEl kit ELISA

No de catálogo LSY-30037
1.Utilización
La Primavera Verde^®El kit de ensayo ELISA de anticuerpos contra la fiebre aftosa porcina de tipo A se utiliza para la detección de anticuerpos contra la fiebre aftosa porcina de tipo A en suero porcino.evaluación de las condiciones de inmunidad contra la fiebre aftosa porcina en la explotación porcina e investigación de la epidemiología de la fiebre aftosa porcina.
 
2Principio.
El kit de prueba de ELISA de anticuerpos de tipo A para la enfermedad de las patas y la boca porcina (FMD) GreenSpring® está hecho de la placa de microtiter recubierta con antígeno (cubierta con antígeno FMD-A-VP1) y otros reactivos.Se aplica el principio de ELISA en fase sólida a la FMD-A-VP1-Ab en suero, luego añadir el conjugado enzimático para unirse específicamente con el complejo de antígeno revestido + FMD-A-VP1-Ab + enzima etiquetado anticuerpo IgG anti-cerdo en la microplaca.generará una cantidad de colorLa profundidad de color es relativa al contenido de la fiebre aftosa-A-VP1-Ab, cuando el valor de color es mayor que el valor límite, los cerdos están bien vacunados o existen infectados naturales.
 
3.Los componentes del kit

 
4Materiales requeridos pero no proporcionados

1 Lector de microplacas (duración de onda doble: 450/630 nm).

2 Micropipeta de precisión (un canal de 1 a 100 ul,0.5-10ul, multicanal 30-300ul)

3 Caja de temperatura constante o caja de baño de agua.

4 Oscilador.

5 Lavadora de microplacas.

6 puntas desechables (10ul, 200ul)
7 Agua desionizada
 
5Requisito de muestra

1 Las muestras son de suero porcino, que debe recogerse sin bacterias. El tiempo de almacenamiento debe ser inferior a 1 semana a 2-8 °C, si es a largo plazo, debe mantenerse a -20 °C.

2 Evitar el uso de muestras con hemólisis severa, precipitados, contaminados por bacterias o suspensión proteica.
 

6Preparación
1) Para obtener los mejores resultados, los reactivos de ELISA deben mantenerse a temperatura ambiente (20-25 °C) durante 30 min. La microplaca debe volver a temperatura ambiente y secarse antes de abrir el envase.
2) Diluir la muestra: diluir la muestra con el diluyente de la muestra a 40 veces. ((serum 5ul + diluyente de la muestra 195ul), la muestra diluida debe mezclarse uniformemente para obtener mejores resultados.
3) Preparación de la solución de lavado: diluir el tampón de lavado concentrado 20 × con agua desionizada 20 veces.(50 ml de tampón de lavado 20 × concentrado + 950 ml de agua desionizada) Es normal que haya cristalización en el tampón de lavado 20 × concentrado., poner a 37°C hasta que se disuelva por completo.
 
7.Procedimiento

1 Sacar las placas recubiertas (pueden separarse) y registrar la posición de la muestra en una hoja de cálculo.2 pozos para el suero de control positivo, añadir suero de control positivo no diluido, 100μL/pozo (está bien no establecer el control en blanco).

2 Mezclar suavemente, cubrir yIncubación a los 37 años°Cdurante 30 minutos.

3 Retire el papel adhesivo. Verter el líquido de los pozos, añadir el amortiguador de lavado diluido en cada pozo completamente, estar estático durante 10s, verter. Repita 3 veces, en la última vez golpear para secar en papel absorbente.

4 Añadir 100 μL de enzima conjugada en cada pozo.

5 Placa de cubierta con nueva lámina adhesiva.Yo...Incubado en 37 °Cpara30 minutos.

6 Repita el paso 3 (lavado).

7 Añadir el sustrato 100ul en cada pozo, mezclar adecuadamente,Incubación durante 10Min en37 °Cen la oscuridadcon una nueva lámina adhesiva.

Añadir 50 μL de solución de parada en cada pozo, mezclar suavemente y determinar el resultado.

9 Medir el valor de OD de cada pozo con un fotómetro a una longitud de onda doble de 450 nm/630 nm.
 
8.Resultados
Para que el ensayo sea válido, el valor medio de OD de los pozos de control positivo debe ser igual o superior a 0.6, y el valor medio de OD de los pozos de control negativos es inferior a 0.1De lo contrario, la prueba es inválida, necesitamos otra prueba.
El resultado se juzgará por el valor S/P,
S/P=(Muestra OD450/630- NCel número)/( PCel número- El NC.el número), NCel númerosignifica el valor medio de OD450/630 del control negativo, PCel númerosignifica el valor medio de OD450/630 del control positivo
Si S/P≥0.2, es positivo; menor que 0.2, es negativo.
 
9. Precauciones y advertencias para los usuarios
1Este kit de prueba es sólo para uso de investigación.
2No utilice reactivos caducados, no mezcle reactivos de lotes diferentes.
3Leer cuidadosamente el manual antes de usar.

4Los desechos de experimentación deben ser tratados con esterilización por vapor a alta presión a 121 °C durante 30 minutos, o tratados con desinfectante de hipoclorito de sodio de 5,0 g/l durante 30 minutos, y luego desechados.

5. La placa de micropozo retirado del ambiente refrigerado debe ser equilibrada humedad para secar a temperatura ambiente, luego se puede abrir.Colocar la placa MicroWell no utilizada en una bolsa de papel seco y sellarla a 4 °CEl reactivo líquido no utilizado debe cubrir las tapas, almacenarse a 2-8 °C en la oscuridad con otros componentes del grupo.
6Se debe utilizar un Micropipettor para añadir la muestra y los reactivos, y a menudo probar su exactitud.

7Cuando se añade tampón de lavado, debe estar lleno pero sin desbordamiento, evitar la aparición de enzimas libres en la boca del pozo o la contaminación cruzada entre los pozos.

8La solución de stop es corrosiva, use una gran cantidad de agua para lavarse inmediatamente al tocar la piel o la ropa.
 
Especificaciones:96 pozos por 2.
Fecha de caducidad:- 12 meses. - ¿Qué es eso?
El almacenamiento:Conservar a una temperatura de 2 a 8 °C, en la oscuridad.
Fecha de producción:En el embalaje exterior del kit de ensayo.