Kit ELISA de anticuerpos contra la enfermedad de Pullorum (PD) y la tifoides aviar (FT) para el diagnóstico de aves de corral

Kit de ELISA de anticuerpos contra la enfermedad del pullo (PD) y la tifoides aviar (FT)

No de catálogo LSY-30027

1. Uso

Este kit se utiliza para detectar anticuerpos contra la enfermedad del Pullorum (PD) y la tifoides aviar (FT) en suero de pollo,para evaluar la condición de los anticuerpos por la enfermedad de Pullorum (PD) y la vacuna contra la fiebre tifoidea en las granjas de pollos y ayudar al diagnóstico de pollos infectados serológicamente.

2Principio.

El kit de ELISA de anticuerpos contra la enfermedad del Pullorum (PD) y la tifoides aviar (FT) se basa en un inmunoensayo enzimático indirecto (ELISA indirecto).El antígeno se recubre en placas.Cuando una muestra de suero contiene anticuerpos específicos contra el virusLavar los anticuerpos no unidos y otros componentes. Luego agregar un conjugado de enzima específica. Después de la incubación y el lavado, agregar el sustrato TMB.Una reacción colorimétrica aparecerá, medido por un espectrofotómetro (450 nm).

3. Reactivos

4.Materiales requeridos pero no suministrados

1) Micropipettores y puntas desechables: 0,5 μL~10 μL,10 μL~100 μL,100 μL~1000 μL

2) Incubadora a 37 °C

3) Botella de medición: 500 ml

4) Lector de microplacas de 96 pozos

5) Agua destilada o agua desionizada

6) Lavadora de botellas o microplacas

5Preparación de las muestras

Tomar sangre animal entera, hacer suero de acuerdo con los métodos regulares, el suero debe ser transparente, sin hemólisis.

6. Preparación del tampón de lavado

Antes de usar, devuelva el tampón de lavado a temperatura ambiente, si hay cristales salados, agite para que los cristales se disuelvan, luego use agua destilada o agua desionizada para diluirlo 10 veces.El amortiguador de lavado del diluyente puede almacenarse durante una semana a 4 °C.

7. Dilución de la muestra

En la placa del diluyente del suero, diluir el suero a 1:100 con el diluyente de la muestra

Nota: el suero de control negativo y el suero de control positivo no necesitan diluirse.Agitar uniformemente la muestra antes de agregarla.

8. Notas

1) Todos los reactivos deben ajustarse a temperatura ambiente y agitarse uniformemente antes de usar, conservarse a 2-8 °C después de usar.

2) No intercambiar los reactivos de los kits de diferentes números de lotes para su uso.

3) El sustrato y la solución de parada pueden ser excitantes para la piel y los ojos, tenga cuidado al usar.

4) No exponga el TMB (Substrato B) a la luz y evite su contacto con antioxidantes.

5) Los pozos deben evitar la humedad o el contacto con el agua después de su apertura (Ponga la microplaca no utilizada de nuevo en el saco con deshidratador a 2 ~ 8 °C pronto)

6) Tratar todos los desechos razonablemente antes de verterlos para evitar la contaminación.

7) Siga estrictamente las instrucciones para obtener el mejor resultado. Todos los procedimientos, incluida la pipetación, el tiempo y el lavado, etc., deben ser precisos.

8) La placa de diluyente del suero es desechable, no se utilice por segunda vez; su volumen máximo es de 300 μl/pozo.

9Procedimiento ELISA

1) Se toma una microplaca preencapsulada (puede abrirse durante varias veces de uso según la cantidad de muestra), se añade 100 μL de suero diluido al pozo de muestra, mientras se pone 1 pozo para el suero de control negativo,2 pozos para el suero de control positivo por separado. añadir 100 μL de suero de control negativo/positivo a sus pozos.

2) Agitar suavemente y cubrir la microplaca con película adhesiva yIncubación a los 37 años°Cdurante 30 minutos.

3) Abrir la película adhesiva, verter el líquido fuera de los pozos, añadir 250 μL de tampón de lavado diluido a cada pozo, verter. Repita 4-6 veces, luego golpear para secar en papel absorbente.

3) Añadir 100 μL de enzima conjugada a cada pozo, cubrir la microplaca con una película adhesiva yIncubación a los 37 años°Cdurante 30 minutos.

4) Abrir la película adhesiva, verter el líquido fuera de los pozos, añadir 250 μL de tampón de lavado diluido a cada pozo, verter. Repita 4-6 veces, luego golpear para secar en papel absorbente.

5) Añadir 100 μL de solución de sustrato a cada pozo, mezclar adecuadamente,reaccionar durante 10 minutos a 37°Cen la oscuridad.

6. Añadir 50 μL de solución de parada en cada pozo y medir el resultado en 10 min.

10Resultados

Se leerá el valor de OD mediante un lector de microplacas a una longitud de onda de OD450 nm (630 nm como referencia).

El ensayo que debe ser válido:

El valor de OD del control negativo (N) < 0.2, mientras que el valor OD del control positivo es > 0.4

Método de cálculo:

Valor OD de la muestra/valor OD promedio del control positivo=valor S/P

En cuanto al resultado:

S/P < 0.35- No.

S/P≥0.35Es positivo.

Especificaciones:96*2 pozos por equipo.

Fecha de caducidad:- 12 meses. - ¿Qué es eso?

El almacenamiento:Almacenamiento a 2-8°C, en la oscuridad.

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