LSY-30019 Streptococcus porcino suis Kit de detección de ELISA de anticuerpos

Se recomienda que se utilicen los siguientes ingredientes:

Kit de pruebas ELISA de anticuerpos

No de catálogo LSY-30019
1- Es muy breve.
El kit GreenSpring® porcine Streptococcus suis antibody ELISA se utiliza para detectar los anticuerpos de Porcine Streptococcus suis en suero porcino y evaluar las condiciones de inmunidad contra S.En la actualidad, el número de animales en las explotaciones porcinas y la epidemiología de la investigación de los S- Suyo.
2Principio.
El kit de ensayo de ELISA de anticuerpos GreenSpring® porcina S.suis está hecho de la placa de microtiter recubierta con antígeno (cubierta con antígeno S.suis) y otros reactivos.Se aplica el principio de ELISA en fase sólida para probar los anticuerpos contra S.suis en suero porcino. En el ensayo, el antígeno recubierto se combina con S.suis-Ab en suero y luego se añade el conjugado enzimático para unirse específicamente con el complejo de antígeno recubierto+S.Sui-Ab+conjugado enzimático en la microplaca. Con el sustrato TMB, generará una cantidad de color. La profundidad de color es relativa al contenido de la S.suis-Ab, cuando el valor de color es mayor que el valor de corte,Los cerdos están bien vacunados o existen animales infectados naturales..
 
3.Componentes

 
4Material requerido pero no proporcionado

1 Lector de microplacas (duración de onda doble: 450/630 nm).

2 Micropipeta de precisión (un canal de 1 a 100 ul,0.5-10ul, multicanal 30-300ul)

3 Caja de temperatura constante o caja de baño de agua.

4 Oscilador.

5 Lavadora de microplacas.

6 puntas desechables (10ul, 200ul)

7 Agua desionizada
 
5Requisito de muestra

1 Las muestras son de suero porcino, que debe recogerse sin bacterias. El tiempo de almacenamiento debe ser inferior a 1 semana a 2-8 °C, si es a largo plazo, debe mantenerse a -20 °C.

2 Evitar el uso de muestras con hemólisis severa, precipitados, contaminados por bacterias o suspensión proteica.

El EDTA, la heparina sódica y otros anticoagulantes no afectarán los resultados.
 
6Preparación
1) Para obtener los mejores resultados, los reactivos de ELISA deben mantenerse a temperatura ambiente (20-25 °C) durante 30 minutos.
2) Diluir la muestra: diluir la muestra con la solución del diluyente de la muestra 40 veces.
3) Preparación de la solución de lavado: diluir el tampón de lavado concentrado 20 × con agua desionizada 20 veces.
 
7Procedimiento

1 Sacar las placas recubiertas (pueden separarse) y registrar la posición de la muestra en una hoja de cálculo.2 pozos para el suero de control positivo, añadir suero de control positivo no diluido, 100μL/pozo ((Está bien no establecer el control en blanco).

2 Mezclar suavemente, incubar a 37°C durante 30 min.

3 Retire la lámina adhesiva. Verter el líquido fuera de los pozos, añadir el tampón de lavado diluido en cada pozo completamente, estar estático durante 10s, directamente verter. Repita 3 veces,Por última vez seco el papel absorbente..

4 Añadir 100 μL de enzima conjugada en cada pozo.

5 Placa de cubierta con nueva lámina adhesiva Incubación a 37°C durante 30 min.

6 Repita el paso 3 (lavado).

Añadir sustrato en cada pozo, 100ul/pozo, mezclar adecuadamente, incubar durante 10 minutos a 37°C en la oscuridad con una nueva lámina adhesiva.

8 Añadir solución de parada en cada pozo, 50ul/pozo, mezclar suavemente y determinar el resultado.

9 Medir el valor de OD de cada pozo con un fotómetro a una longitud de onda doble de 450 nm/630 nm.
 
8Análisis de ELISA
Para que el ensayo sea válido, el valor medio de OD de los pozos de control positivo debe ser igual o superior a 0.6, y el valor medio de OD de los pozos de control negativos es inferior a 0.15De lo contrario, la prueba es inválida, necesitamos otra prueba.
El resultado se juzgará por el valor S/P,
S/P=(Muestra OD450/630- NCel número)/( PCel número- El NC.el número), NCel númerosignifica el valor medio de OD450/630 del control negativo, PCel númerosignifica el valor medio de OD450/630 del control positivo
Si S/P≥0.2, es positivo; menor que 0.2, es negativo.
 
9Interpretación del resultado

1. La hemólisis severa, la fibra proteica en el suero de separación no es suficiente, que contiene eritrocitos, un precipitado, una muestra con bacterias puede conducir a un falso positivo.

2Los resultados negativos pueden ocurrir en cerdos individuales después de las vacunas debido a las diferencias individuales o la duración de la inmunidad.

3Los resultados positivos para el diagnóstico serológico y la investigación epidemiológica de los cerdos se combinarán con otros métodos y datos clínicos.
 
10. Desempeño del producto

1Especificidad: utilizar este kit para detectar suero de referencia, la tasa de cumplimiento alcanza el 100%.

2- Sensibilidad: puede alcanzar max. 1:1600.

3Precisión: CV (%) no superior al 8%.

4Estabilidad: almacenar a 2°C ∼ 8°C durante 12 meses o almacenar a 37°C durante 3 días, el resultado puede alcanzar los 3 estándares anteriores.
 
11. Precauciones y advertencias para los usuarios
1Este kit de prueba es adecuado para el diagnóstico in vitro.
2No utilice reactivos caducados, no mezcle reactivos de lotes diferentes.
3Leer cuidadosamente el manual antes de usar.

4Los desechos de experimentación deben ser tratados con esterilización por vapor a alta presión a 121 °C durante 30 minutos, o tratados con desinfectante de hipoclorito de sodio de 5,0 g/l durante 30 minutos, y luego desechados.

5. La placa de micropozo retirado del ambiente refrigerado debe ser equilibrada humedad para secar a temperatura ambiente, luego se puede abrir.Colocar la placa MicroWell no utilizada en una bolsa de papel seco y sellarla a 4 °CEl reactivo líquido no utilizado debe cubrir las tapas, almacenarse a 2-8 °C en la oscuridad con otros componentes del grupo.

6Si el tampón de lavado concentrado 20× parece cristalino, es normal, ponerlo a 37°C hasta disolverse.
7Se debe utilizar un Micropipettor para añadir la muestra y los reactivos, y a menudo probar su exactitud.

8Cuando se añade tampón de lavado, debe estar lleno pero sin desbordamiento, evitar la aparición de enzimas libres en la boca del pozo o la contaminación cruzada entre los pozos.

9La solución de stop es corrosiva, use una gran cantidad de agua para lavarse inmediatamente al tocar la piel o la ropa.
 
Especificaciones:96 pozos por 2.
Fecha de caducidad:- 12 meses. - ¿Qué es eso?
El almacenamiento:Conservar a una temperatura de 2 a 8 °C, en la oscuridad.
Fecha de producción:En el embalaje exterior del kit de ensayo.