Kit de pruebas de detección de la enfermedad porcina con anticorpos PRV gE ELISA

Kit de prueba para distinguir los anticuerpos del virus de la pseudorabia porcina gE

No de catálogo LSY-30005

1. Uso

La Primavera Verde^®Se utiliza el kit de prueba para distinguir los anticuerpos del virus de la Pseudorabia porcina gE para la detección de anticuerpos contra la glicoproteína del virus de la Pseudorabia porcina gE en suero porcino.Se utiliza para distinguir y diagnosticar Pseudorabias porcinas Virus gE falta de vacunación Cerdo inmune y cerdo naturalmente infectado.

2Principio.

El kit GreenSpring® para la prueba de la distinción de anticuerpos contra el virus de la Pseudorabia porcina gE utiliza el principio del ensayo de inmunosorbente ligado a enzimas en fase sólida (ELISA).y consiste en una placa de reacción de microondas recubierta con antígeno de proteína PRV gE de alta purezaEl mecanismo de reacción es que el antígeno recubierto se combina con el PRV-gE-Ab en la muestra,y luego combinado con el anticuerpo IgG anti-cerdo etiquetado por la enzima para formar un complejo "antigeno revestido + PRV-gE-Ab + anticuerpo IgG anti-cerdo etiquetado por la enzima"La profundidad del color es directamente proporcional a la cantidad de PRV-gE-Ab.el resultado obtenido por el lector de microplacas excede el umbral establecido, y el resultado es positivo, lo que indica que hay anticuerpos del virus salvaje.

3.Los componentes del kit

4Materiales requeridos pero no proporcionados

1. Lector de microplacas (longitud de onda doble: 450/630 nm).
2. Micropipeta de precisión (un canal de 1 a 100 ul,0.5-10ul, multicanal 30-300ul)
3. Caja de temperatura constante o caja de baño de agua.
4. Es un oscilador.
5. Las puntas desechables (10ul, 200ul)
6. Agua desionizada

5Requisito de muestra

1. Las muestras son de suero porcino, que debe recogerse sin bacterias. El tiempo de almacenamiento debe ser inferior a 1 semana a 2-8 °C, si es a largo plazo, debe mantenerse a -20 °C.
2. Evitar el uso de muestras con hemólisis severa, precipitados, contaminados por bacterias o suspensión proteica.

6Preparación

1) Para obtener los mejores resultados, los reactivos de ELISA deben mantenerse a temperatura ambiente (20-25 °C) durante 30 minutos.

2) Diluir la muestra: diluir la muestra con el diluyente de la muestra a 40 veces. ((serum 5ul + diluyente de la muestra 195ul), la muestra diluida debe mezclarse uniformemente para obtener mejores resultados.

3) Preparación del amortiguador de lavado: diluir el amortiguador de lavado 10 × concentrado con agua desionizada 10 veces.(10 ml de 10 × tampón de lavado concentrado + 90 ml de agua desionizada) Es normal si hay cristalización en el tampón de lavado concentrado de 10 ×, poner a 37°C hasta que se disuelva por completo.

7Procedimiento

1. Sacar las placas recubiertas (pueden separarse) y registrar la posición de la muestra en una hoja de cálculo.2 pozos para el suero de control positivo, añadir el suero de control positivo no diluido, 100μL/pozo (no establecer el pozo en blanco está bien).
2. Mezclar suavemente, cubrir yIncubación a los 37 años°Cdurante 30 minutos.
3. Retire la lámina adhesiva. Verter el líquido fuera de los pozos, añadir el tampón de lavado diluido en cada pozo completamente, estar estático durante 10s y verter. Repita 3 veces, en la última vez golpear para secar en papel absorbente.
4. Añadir 100 μL de enzima conjugada en cada pozo.
5. Placa de cubierta con nueva lámina adhesiva.Incubación a los 37 años°Cdurante 30 minutos.
6. Repita el paso 3 (lavado).
7. Añadir sustrato 100ul en cada pozo, mezclar adecuadamente,Incubación durante 10 minutos a 37 °C°Cen la oscuridadcon una nueva lámina adhesiva.
8. Añadir 50 μL de solución de parada en cada pozo, mezclar suavemente durante 10 segundos y determinar el resultado.
9. Se medirá el valor OD de cada pozo con un fotómetro a doble longitud de onda de 450 nm/630 nm.

8Resultados

Para que el ensayo sea válido, el valor medio de OD de los pozos de control positivo debe ser igual o superior a 0.5, y el valor medio de OD de los pozos de control negativos es inferior a 0.1De lo contrario, la prueba es inválida, necesitamos otra prueba.

El resultado se juzgará por el valor S/P,

S/P=(Muestra OD450/630- NCel número)/( PCel número- El NC.el número), NCel númerosignifica el valor medio de OD450/630 del control negativo ((se calcula como 0,05 cuando el valor es inferior a 0,05), PCel númerosignifica el valor medio de OD450/630 del control positivo

Si S/P≥0.23, es positivo; menor que 0.23, es negativo.

9. Precauciones y advertencias para los usuarios

1Leer cuidadosamente el manual antes de usar.

2No utilice reactivos caducados, no mezcle reactivos de lotes diferentes.

3Los desechos de experimentación deben ser tratados con esterilización por vapor a alta presión a 121 °C durante 30 minutos, o tratados con desinfectante de hipoclorito de sodio de 5,0 g/l durante 30 minutos, y luego desechados.

4. La placa de micropozo retirado del ambiente refrigerado debe ser equilibrada humedad para secar a temperatura ambiente, luego se puede abrir.Colocar la placa MicroWell no utilizada en una bolsa de papel seco y sellarla a 4 °CEl reactivo líquido no utilizado debe cubrir las tapas, almacenarse a 2-8 °C en la oscuridad con otros componentes del grupo.

5Se debe utilizar un Micropipettor para añadir la muestra y los reactivos, y a menudo probar su exactitud.

6Cuando se añade tampón de lavado, debe estar lleno pero sin desbordamiento, evitar la aparición de enzimas libres en la boca del pozo o la contaminación cruzada entre los pozos.

7La solución de stop es corrosiva, use una gran cantidad de agua para lavarse inmediatamente al tocar la piel o la ropa.

Especificaciones:96 pozos por 2.

Fecha de caducidad:- 12 meses. - ¿Qué es eso?

El almacenamiento:Conservar a una temperatura de entre 2 y 8 °C, en la oscuridad,No congelado.

Fecha de producción:En el embalaje exterior del kit de ensayo.

La empresa de biotecnología Shenzhen Lvshiyuan Co., Ltd.

D Edificio, Parque industrial biológico nacional de la vida marina, No.2 Binhai Road, Dapeng, Shenzhen, China, 518120

Tel. 86-755-28438788 El teléfono está en el teléfono.

Por fax 86-755-28938800

El correo electrónico:Información sobre las medidas de seguridad

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