Kit ELISA de anticuerpos contra el virus del síndrome reproductivo y respiratorio porcino (PRRSV)

Virus del síndrome reproductivo y respiratorio porcino (PRRSV)) Kit ELISA de anticuerpos

No de catálogo LSY-30010

1- Es muy breve.

La Primavera Verde^®El kit de prueba de anticuerpos del virus del síndrome reproductivo y respiratorio porcino (PRRSV Ab) se utiliza para la detección de anticuerpos del PRRSV en suero porcino.evaluación de las condiciones de inmunidad contra el virus del síndrome reproductivo y respiratorio porcino en las explotaciones porcinasLa investigación epidemiológica del PRRSV.

2Principio.

El kit de ensayo de ELISA de anticuerpos contra el PRRSV GreenSpring® utiliza el principio del ensayo de inmunosorbente ligado a enzimas en fase sólida (ELISA),y consiste en una placa de reacción de microondas recubierta con antígeno PRRSV de alta purezaEl mecanismo de reacción es que el antígeno recubierto se combina con el PRRSV-Ab en la muestra,y luego se combina con el anticuerpo IgG anti-cerdo etiquetado por la enzima para formar un complejo "antigeno revestido+anticuerpo IgG anti-cerdo etiquetado por la enzima PRRSV-Ab"La profundidad del color es directamente proporcional a la cantidad de PRRSV-Ab. Cuando se detecta la reacción de color de la muestra, el color de la muestra se refleja en el color de la muestra.el resultado obtenido por el lector de microplacas excede el umbral establecido, y el resultado es positivo, lo que indica que el sistema inmune ha producido anticuerpos o que hay una infección natural.

3. Componentes

4Material requerido no proporcionado

1. Lector de microplacas (longitud de onda doble: 450/630 nm).
2. Lavadora de microplacas.
3. Micropipetas, ajustables (longitud de onda única de 1 a 100 ul,0.5-10 pulgadas, longitud de onda múltiple 30-300 pulgadas).
4. Caja de temperatura constante o caja de baño de agua.
5. Es un oscilador.
6. Las puntas desechables (10ul, 200ul)
7. Agua desionizada

5Requisito de muestra

1. Las muestras son de suero porcino, que debe recogerse sin bacterias. El tiempo de almacenamiento debe ser inferior a 1 semana a 2-8 °C, si es a largo plazo, debe mantenerse a -20 °C.
2. Evitar el uso de muestras con hemólisis severa, precipitados, contaminados por bacterias o suspensión proteica.

6Preparación

1) Para obtener los mejores resultados, los reactivos de ELISA deben mantenerse a temperatura ambiente (20-25 °C) durante 30 minutos.

2) Diluir la muestra: diluir la muestra con la solución del diluyente de la muestra a 40 veces ((por ejemplo: muestra de suero de 5ul + solución del diluyente de la muestra de 195ul), la muestra diluida debe mezclarse uniformemente para obtener mejores resultados.

3) Preparación de la solución de lavado: diluir el tampón de lavado 10 × concentrado con agua desionizada 10 veces (por ejemplo, 10 ml de tampón de lavado 10 × concentrado + 90 ml de agua desionizada ),si hay cristalización en el tampón de lavado 10 × concentrado, es normal, disuélvela a 37°C.

7Procedimiento

1. Añadir muestra: extraer las placas recubiertas requeridas de acuerdo con la cantidad de muestra (se puede separar) y registrar la posición de la muestra en una hoja de cálculo.Conjunto de 2 pozos para el suero de control negativo y 2 pozos para el suero de control positivo, añadir suero de control negativo y positivo sin diluir a su pozo, 100 μL/pozo, respectivamente.
2. con un contenido de aluminio superior a 0,9%,Incubación a los 37 años°Cdurante 30 minutos.
3. Retire la lámina adhesiva. verter el líquido fuera de los pozos, añadir la solución de lavado en cada pozo completamente, estar estático durante unos 10 segundos, verter directamente. repita 3 veces,Por última vez seco el papel absorbente..
4. Añadir 100 μL de enzima conjugada en cada pozo.
5. Placa de cubierta con nueva lámina adhesiva.Incubación a los 37 años°Cdurante 30 minutos.
6. Repita el paso 3 (lavado).
7. Añadir 100ul sustrato en cada pozo, mezclar adecuadamente,Incubación durante 10 minutos a 37 °C°Cen la oscuridad.
8. Añadir 50 μL de solución de parada en cada pozo, mezclar suavemente durante 10 segundos y determinar el resultado.
9. Se medirá el valor de OD con un fotómetro a 450 nm/630 nm.

8Análisis de ELISA

Se medirá el valor de OD de cada pozo, para que el ensayo sea válido deben cumplirse las siguientes especificaciones: el valor medio de OD del control positivo para PRRSV debe ser igual o superior a 0.60, el valor medio de OD del control PRRSV-negativo debe ser inferior a 0.15.

El resultado se juzgará por el valor S/P,

S/P=(OD de la muestra_{No incluidos}- El NC.el número)/( PCel número- El NC.el número), NCel númerosignifica la OD media del control negativo_{No incluidos}Valor en PCel númerosignifica la DO media del control positivo_{No incluidos}Valor

Si S/P≥0.2, es positivo; menor que 0.2, es negativo.

9.Precauciones y advertencias para los usuarios

1Leer cuidadosamente el manual antes de usar.

2No utilice reactivos caducados, no mezcle reactivos de lotes diferentes.

3Los desechos de experimentación deben ser tratados con esterilización por vapor a alta presión a 121 °C durante 30 minutos, o tratados con desinfectante de hipoclorito de sodio de 5,0 g/l durante 30 minutos, y luego desechados.

4. La placa de micropozo retirado del ambiente refrigerado debe ser equilibrada humedad para secar a temperatura ambiente, luego se puede abrir.Colocar la placa MicroWell no utilizada en una bolsa de papel seco y sellarla a 4 °CEl reactivo líquido no utilizado debe cubrir las tapas, almacenarse a 2-8 °C en la oscuridad con otros componentes del grupo.

5Se debe utilizar un Micropipettor para añadir la muestra y los reactivos, y a menudo probar su exactitud.

6Cuando se añade tampón de lavado, debe estar lleno pero sin desbordamiento, evitar la aparición de enzimas libres en la boca del pozo o la contaminación cruzada entre los pozos.

7La solución de stop es corrosiva, use una gran cantidad de agua para lavarse inmediatamente al tocar la piel o la ropa.

Especificación

Embalaje: 96 pozos por 2.

Fecha de caducidad: 12 meses.

Almacenamiento: Almacenamiento a 2 ~ 8 °C en la oscuridad, no congelación.

La empresa de biotecnología Shenzhen Lvshiyuan Co., Ltd.

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