LSY-30008 Kit de detección ELISA del virus de la encefalitis porcina (JEV) Kit de prueba Elisa porcina

Encefalitis porcina japonesa B del virus A.b Las pruebas de ELISAEl kit

No de catálogo LSY-30008
1.Utilización
El kit de ensayo ELISA de anticuerpos IgG del virus de la encefalitis porcina japonesa B se utiliza para la detección de anticuerpos IgG del virus de la encefalitis porcina en suero porcino.evaluación de las condiciones de inmunidad contra el virus de la encefalitis porcina, diagnóstico serológico de la infección porcina en las granjas porcinas e investigación de la epidemiología del virus de la encefalitis porcina.
 
2Principio.
El kit de prueba de ELISA de anticuerpos IgG contra el virus de la encefalitis B porcina japonesa GreenSpring® está hecho de la placa de microtiter recubierta con antígeno (cubierta con antígeno JEV) y otros reactivos.Se aplica el principio de ELISA en fase sólida a JEV-IgG en suero, luego añadir el conjugado enzimático para unirse específicamente con el complejo de antígeno revestido +JEV-IgG +anticuerpo enzimático etiquetado anti-cerdo-IgG en la microplaca.generará una cantidad de colorLa profundidad de color es relativa al contenido de JEV-IgG, cuando el valor de color es mayor que el valor límite, los cerdos están bien vacunados o existen infecciones naturales.
 
3.Los componentes del kit

 
4Materiales requeridos pero no proporcionados

1 Lector de microplacas (duración de onda doble: 450/630 nm).

2 Micropipeta de precisión (un canal de 1 a 100 ul,0.5-10ul, multicanal 30-300ul)

3 Caja de temperatura constante o caja de baño de agua.

4 Oscilador.

5 puntas desechables (10ul, 200ul)
6 Agua desionizada
 
5Requisito de muestra

1 Las muestras son de suero porcino, que debe recogerse sin bacterias. El tiempo de almacenamiento debe ser inferior a 1 semana a 2-8 °C, si es a largo plazo, debe mantenerse a -20 °C.

2 Evitar el uso de muestras con hemólisis severa, precipitados, contaminados por bacterias o suspensión proteica.

6Preparación
1) Para obtener los mejores resultados, llevar los reactivos de ELISA a temperatura ambiente (20-25 °C) durante 30 minutos, abrir la microplaca después de volver a temperatura ambiente y secar con humedad.
2) Diluir la muestra: diluir la muestra con la solución del diluyente de la muestra a 40 veces. (por ejemplo, muestra de suero de 5ul + solución de diluyente de la muestra de 195ul)
3) Preparación de la solución de lavado: diluir 20 veces el tampón de lavado concentrado con agua desionizada (por ejemplo, 50 ml de tampón de lavado concentrado + 950 ml de agua desionizada ),si hay cristalización en el tampón de lavado concentrado 20 ×, es normal, disuélvela a 37°C.
 
7. PruebaProcedimiento

1 Sacar las placas recubiertas (pueden separarse) y registrar la posición de la muestra en una hoja de cálculo.2 pozos para el suero de control positivo, se añade suero de control positivo no diluido, 100 μL/pozo.

2 Mezclar suavemente, cubrir yIncubación a los 37 años°Cdurante 30 minutos.

3 Retire la lámina adhesiva. verter el líquido fuera de los pozos, añadir el tampón de lavado diluido en cada pozo completamente, estar estático durante 10s y verter. Repita 3 veces,Por última vez seco el papel absorbente..

4 Añadir 100 μL de enzima conjugada en cada pozo.

5 Placa de cubierta con nueva lámina adhesiva.Yo...Incubado en 37 °Cpara30 minutos.

6 Repita el paso 3 (lavado).

7 Añadir el sustrato 100ul en cada pozo, mezclar adecuadamente,Incubación durante 10Min en37°Cen la oscuridadcon una nueva lámina adhesiva.

Añadir 50 μL de solución de parada en cada pozo, mezclar suavemente y determinar el resultado.

9 Mide el valor de OD de cada pozo con un fotómetro a una longitud de onda doble de 450 nm/630 nm.
 
8.Resultados
Para que el ensayo sea válido, el valor medio de OD de los pozos de control positivo debe ser igual o superior a 0.6, y el valor medio de OD de los pozos de control negativos es inferior a 0.1De lo contrario, la prueba es inválida, necesitamos otra prueba.
El resultado se juzgará por el valor S/P,
S/P=(Muestra OD450/630- NCel número)/( PCel número- El NC.el número), NCel númerosignifica el valor medio de OD450/630 del control negativo ((se calcula como 0,05 para valores inferiores a 0,05), PCel númerosignifica el valor medio de OD450/630 del control positivo
Si S/P≥0.25, es positivo; menor que 0.25, es negativo.
 
9. Precauciones y advertencias para los usuarios
1Este kit de prueba es para uso de investigación solamente.
2Lea atentamente la instrucción antes de realizar el ensayo.

3Los desechos de experimentación deben ser tratados con esterilización por vapor a alta presión a 121 °C durante 30 minutos, o tratados con desinfectante de hipoclorito de sodio de 5,0 g/l durante 30 minutos, y luego desechados.

4. La placa de micropozo retirado del ambiente refrigerado debe ser equilibrada humedad para secar a temperatura ambiente, luego se puede abrir.Colocar la placa MicroWell no utilizada en una bolsa de papel seco y sellarla a 4 °CEl reactivo líquido no utilizado debe cubrir las tapas, almacenarse a 2-8 °C en la oscuridad con otros componentes del grupo.
5Se debe utilizar un Micropipettor para añadir la muestra y los reactivos, y a menudo probar su exactitud.

6Cuando se añade tampón de lavado, debe estar lleno pero sin desbordamiento, evitar la aparición de enzimas libres en la boca del pozo o la contaminación cruzada entre los pozos.

7La solución de stop es corrosiva, use una gran cantidad de agua para lavarse inmediatamente al tocar la piel o la ropa.
 
Especificaciones:96 pozos por 2.
Fecha de caducidad:- 12 meses. - ¿Qué es eso?
El almacenamiento:Conservar a una temperatura de 2 a 8 °C, en la oscuridad.
Fecha de producción:En el embalaje exterior del kit de ensayo.
 
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