Kit de ensayo ELISA de anticuerpos del subtipo H5 de la gripe aviar para el diagnóstico de enfermedades de las aves de corral (trabajo para pollo, pato, ganso, etc.)

Kit de ensayo ELISA de anticuerpos del subtipo H5 de la gripe aviar

(Trabajo para el pollo, el pato, el ganso, etc.)

No de catálogo LSY-30011

1- Es muy breve.

Este kit se utiliza para detectar anticuerpos del subtipo H5 de la gripe aviar en suero de aves de corral, aves silvestres, etc.para evaluar la condición de los anticuerpos de las aves de corral vacunadas contra la gripe aviar H5 y ayudar al diagnóstico de aves de corral infectadas serológicamente.

Este kit utiliza el método ELISA de bloqueo, el antígeno H5 se recubre previamente en tiras de micro-pozo de enzimas,detección indirecta de anticuerpos anti-H5 en suero por anticuerpos anti-monoclonales compiten con los anticuerpos en suero por los sitios de unión en los vectores de fase sólidaCuando se hace la prueba, se añade una muestra de suero diluida, después de la incubación, si hay anticuerpos específicos del virus H5, se combinará con el antígeno pre-revestido,desechar el anticuerpo no combinado y otros componentes con lavado; luego añadir el anticuerpo monoclonal del virus H5 etiquetado con enzimas, el anticuerpo en el bloque de la muestra, la combinación de anticuerpo monoclonal y antígeno preencapsulado;desechar el conjugado enzimático no combinado con el lavadoSe añade sustrato de TMB en micro-pozos, la señal azul por catálisis enzimática es inversamente proporcional al contenido de anticuerpos en la muestra,utilizar el lector ELISA a 450 nm para medir el valor de absorbancia A en los pozos de reacción después de añadir la solución de parada para detener la reacción.

2.Reactivos

3.Materiales requeridos pero no suministrados

1) Micropipeta: 10ul-100ul, 100ul-1000ul. El uso de la micropipeta en el tratamiento de las enfermedades de las personas con discapacidad es muy importante.

2) Las puntas de las pipetas desechables.

3) Graduado: 500 ml.

4) Lector de microplacas: 96 pozos con longitud de onda de 450/630 nm.

5) Agua destilada o agua desionizada.

6) Lavadora de botellas o lavadora de microplacas

4Preparación de las muestras

Tomar sangre animal entera, hacer suero de acuerdo con los métodos regulares, el suero debe ser transparente, no tienen hemólisis.

5Preparación del tampón de lavado

Devuelva 10 veces el tampón de lavado concentrado a temperatura ambiente antes de su uso, si hay cristales de sal, agite para que se disuelva, luego diluya a 10 veces con agua destilada o agua desionizada.El amortiguador de lavado diluido puede almacenarse a 4°C durante aproximadamente 1 semana.

6.Las notas

1) Coloque todos los reactivos a temperatura ambiente antes de su uso, mantenga los reactivos a temperatura ambiente durante al menos 1 hora, agite uniformemente antes de su uso y conserve a 2-8°C después de su uso.

2) No mezcle los reactivos de uso de diferentes kits y de diferentes lotes, evitando que los reactivos se contaminen durante el uso.

3) El sustrato y la solución de parada pueden provocar irritación en la piel y los ojos, tenga cuidado al utilizar.

4) No exponga el sustrato a una luz fuerte y evite el contacto con el oxidante.

5) Las placas revestidas con H5 Ag deben estar selladas y a prueba de humedad.

6) Todos los desechos deben tratarse bien para evitar la contaminación antes de ser desechados.

7) El cumplimiento estricto de las instrucciones de operación puede obtener los mejores resultados.

8) H5 Ag Las placas recubiertas son desechables, no se deben repetir.

7Procedimiento ELISA

1) Tomar la placa recubierta de antígeno (la placa puede abrirse y utilizarse varias veces según la cantidad de muestra cada vez), para cada prueba,se establece 1 pozo para el control positivo y 2 pozos para el control negativo, el control positivo y el control negativo no necesitan diluirse, tomar 100ul directamente y añadir en su pozo;

2) Añadir dilución de la muestra a los pozos de reacción, 50ul/pozo, luego añadir la muestra de suero a los pozos de reacción, 50ul/pozo, soplar y mezclar uniformemente ((No mezclar las puntas de uso)

3) Cubrirlo con papel adhesivo, incubara 37°C durante 120 minutos;

4) Abrir la lámina adhesiva, desechar el líquido del pozo, añadir tampón de lavado diluido a cada pozo, 250ul/pozo, luego desechar el líquido, repetir el paso anterior durante 6 veces,al final, se seca con el papel absorbente;

5) Añadir el conjugado de enzimas 100ul/pozo, cubrirlo con papel adhesivo,Incubacióna los 37 años°Cdurante 30 minutos;

6) Abrir la lámina adhesiva, desechar el líquido del pozo, lavando durante 6 veces como paso 4), recuerde en el último tapa para secar con el papel absorbente;

7) Añadir sustrato, 100ul/pozo, mezclar uniformemente y luego cubrirlo con papel adhesivo,Incubacióna los 37 años°Cen la oscuridad durante 15 minutos;

8) Añadir solución de parada 50ul/pozo para detener la reacción, medir el resultado en 10 minutos.

8Resultados

Se leerá el valor de la DO con el lector de microplacas a 450 nm (630 nm como referencia).

Para que el ensayo sea válido:

Valor medio de la DO del control negativo (N) > 0.4;

Mientras tanto, el valor OD del control positivo (P) / el valor medio OD del control negativo (N) < 0.4.

Método de cálculo:

Valor OD de las muestras/valor medio OD del control negativo = valor S/N

Juez de resultados:

S/N ≥ 055, negativo;

S/N < 0.55Eso es.

Especificaciones:96 o 96*2 pozos por kit.

Fecha de caducidad:- 12 meses. - ¿Qué es eso?

El almacenamiento:Almacenamiento a 2-8°C, en la oscuridad.

La empresa de biotecnología Shenzhen Lvshiyuan Co., Ltd.

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