LSY-30007 Circovirus porcino (PCV2) ELISA kit192wells de diagnóstico/equipo

Equipo porcino de la prueba de Circovirus de la primavera verde (PCV2) ELISA

No. LSY-30007 del catálogo

1. Uso

El equipo circovirous porcino de ELISA Test del ^® de GreenSpring (PCV2) se utiliza para la detección del tipo porcino del circovirus - anticuerpo 2 en suero porcino; evaluación de las condiciones de la inmunidad contra circovirus porcino en la granja de cerdo e investigación de la epidemiología del circovirus porcino. Mientras que el resultado no puede distinguir el anticuerpo inmune y el anticuerpo infeccioso, confirmar que es el anticuerpo por la infección vaccínea o salvaje del virus necesita combinar datos clínicos, la situación inmune, y otros métodos de diagnóstico.

2. Principio

El equipo de la prueba del anticuerpo ELISA de GreenSpring® PCV2 se hace de la placa de microtítulo revestida del antígeno (cubierta con el antígeno de PCV) y de otros reactivo. Aplica el principio de la Sólido-fase ELISA al PCV-Ab en suero, entonces añade la enzima conjuga para atar específicamente con el complejo de antigen+PCV-Ab+enzyme revestido etiquetó el anticuerpo del anti-cerdo-IgG en el microplate. Con el substrato de TMB, generará una cantidad de color. La profundidad del color es relativa con el contenido del PCV-Ab, cuando el valor del color es mayor que el valor del atajo, los cerdos se vacuna bien o naturales infectados existen.

3. Los componentes del equipo

4. Materiales requeridos pero no proporcionados

1 lector de Microplate (longitud de la doble-onda: 450/630 nanómetro).

Micropipeta exacta 2 (1-100ul monocanal, 0.5-10ul, 30-300ul de varios canales)

Caja de la temperatura constante 3 o caja del baño de agua.

Oscilador 4.

Lavadora de 5 Microplate.

6 extremidades disponibles (10ul, 200ul)

7   Agua desionizada

5. Requisito de la muestra

1 las muestras es el suero porcino, que se debe recoger sin bacterias. El tiempo de almacenamiento debe ser menos de 1 semana en el ℃ 2-8, si para el largo plazo, debe ser guardado en -20℃.

2 evite para utilizar las muestras con la hemólisis severa, precipitado, contaminado por las bacterias o la suspensión de la proteína.

3 El EDTA, sodiun de la heparina y otros anticoagulantes no afectarán a los resultados.

6. Preparación

1) trae los reactivo de ELISA a la temperatura ambiente (℃ 20-25) para que el minuto 30 consiga los mejores resultados.

2) Muestree diluído: Muestra diluída con el diluyente de la muestra en 40 veces. (Habrá cambio del color después de añadir la solución), la muestra diluida necesita mezclarse uniformemente para conseguir mejores resultados.

3) Preparación de la solución que se lava: Diluya el almacenador intermediario del lavado 20×concentrated con agua desionizada en 20 veces.

7. procedimiento

1 saque las placas revestidas (puede ser separado) y registrar la posición de la muestra respecto a una hoja de trabajo. Fijado 2 pozos para el suero negativo del control, añada el suero negativo no diluido del control, 2 pozos para el suero positivo del control, añaden el suero positivo no diluido del control, 100μL/well. Otros son pozos de la muestra, añaden la muestra diluida, 100μL cada uno (amba sola prueba bien y doble-bien está MUY BIEN).

La mezcla 2 suavemente, cubre e incuba en el℃ 37 para 30 mínimos.

3 quite la hoja adhesiva. Vierta el líquido fuera de los pozos, añada el almacenador intermediario que se lava diluido en cada pozo completamente, para verter directamente, ninguna necesidad de ser estático. Repita 3 veces, en la palmadita de la última vez de secarse en el papel absorbente.

4 añada la conjugación de la enzima 100μL en cada pozo.

Tapadera 5 con la nueva hoja adhesiva. Incube en el ℃ 37 para 30 mínimos.

Paso 3 (lavado) de 6 repeticiones.

7 añada el substrato 100ul en cada pozo, se mezclan correctamente, incuban para el minuto 10 en el ℃ 37 en la oscuridad con la nueva hoja adhesiva.

8 añada la solución 50μL en cada pozo, mezcla de la parada suavemente y determinar el resultado.

9 medidas el valor del OD de cada pozo con un fotómetro en la longitud 450nm/630nm de la dual-onda.

8. resultados

Para que el análisis sea válido, el valor medio del OD de los pozos positivos del control debe ser mayor o igual 0,6, y el valor medio del OD de los pozos negativos del control es menos de 0,1. Si no la prueba es inválida, prueba de la necesidad otra vez.

El resultado es juzgado por valor de S/P,

S/P= (muestra OD450/630- NCx (—))/(PCx (—) - NCx (—)), NCx (—) significa el valor medio OD450/630, PCx del control negativo (—) significa el valor medio OD450/630 del control positivo

Si S/P≥0.2, él es positivo; menos de 0,2, es negativo.

9. interpretación del resultado

1. La hemólisis severa, proteína de la fibra en la separación del suero no es suficiente, conteniendo eritrocitos, un precipitado, una muestra con las bacterias puede llevar al falso positivo.

2. los resultados negativos pueden ocurrir en cerdos individuales después de las vacunas debido a las diferencias individuales o a la duración inmune.

3. Resultados positivos para la diagnosis serológica y la investigación epidemiológica de los cerdos que se combinarán con otros métodos y datos clínicos.

10. funcionamiento de producto

1. especificidad: utilice este equipo para detectar el suero de la referencia, el alcance 100% de la tarifa de la conformidad.

2. sensibilidad: puede alcanzar 1:5120 máximo.

3. precisión: CV (%) no más grande el que 8%.

4. estabilidad: La tienda en 2℃~8℃ por 12 meses o la tienda en 37℃ por 3 días, el resultado puede alcanzar sobre el estándar 3.

11. Precauciones y advertencias para los usuarios

1. Este equipo de la prueba está para el uso de la investigación solamente.

2. No utilice los reactivo expiró, no mezclan los reactivo de diversas porciones.

3. Lea el manual cuidadosamente antes de usar.

4. Los desperdicios del experimento se deben ocupar de la esterilización de alta presión del vapor en el ℃ 121 por 30 minutos, o tratar con el desinfectante del hipoclorito de sodio 5.0g/L para 30 minutos, después el descarte.

5. La placa de MicroWell quitada del ambiente refrigerado debe ser humedad equilibrada a secarse en la temperatura ambiente, después puede ser abierta. Ponga la placa inusitada trasera de MicroWell en bolso seco de la hoja y la selló en el ℃ 4. El reactivo líquido inusitado debe cubrir los casquillos, tienda en el ℃ 2-8 en oscuridad con otros componentes del grupo.

6. Si el almacenador intermediario del lavado 20×concentrated aparece cristalino, es normal, puesto en 37℃ hasta disuelto.

7. Debe utilizar Micropipettor para añadir la muestra y los reactivo, e impermeabiliza a menudo su exactitud.

8. Al añadir el almacenador intermediario del lavado, debe ser lleno pero ningún desbordamiento, evitar la enzima libre que aparece en la boca de la contaminación bien o cruzada entre los pozos.

9. Pare la solución es corrosivo, utiliza una gran cantidad de agua para lavarse inmediatamente cuándo tocar la piel o la ropa.

Especificaciones: 96 wells×2.

Fecha de vencimiento: 12 meses.

Almacenamiento: Tienda en 2~8℃, en la oscuridad.

Fecha de producción: En el externo-embalaje del equipo de la prueba.

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