Kit de pruebas ELISA de detección de la fiebre aftosa del subtipo O

Kit ELISA de anticuerpos contra la fiebre aftosa tipo O

No de catálogo LSY-30002

1. Uso

La Primavera Verde^®El kit de ensayo ELISA de anticuerpos contra la fiebre aftosa porcina tipo O se utiliza para detectar anticuerpos contra la fiebre aftosa porcina tipo O en suero porcino.evaluación de las condiciones de inmunidad contra la fiebre aftosa porcina en la explotación porcina e investigación de la epidemiología de la fiebre aftosa porcina.

2Principio.

Este kit de ensayo se basa en el principio del ensayo de inmunosorbente ligado a enzimas en fase sólida (ELISA), que consiste en una placa de reacción de microondas recubierta con proteína estructural VP1 de la fiebre aftosa porcina tipo O,IgG y otros reactivos antiporcinos marcados con peroxidasa de rábano picanteEl mecanismo de reacción es una combinación de antígenos recubiertos con FMDV-VP1-Ab en la muestra.luego se combinan con IgG anti-porcino etiquetado con enzimas para formar un complejo de ¢antigeno recubierto+FMDV-VP1-Ab+ anticuerpo IgG anti-porcino etiquetado con enzimasLa profundidad del color es directamente proporcional a la cantidad de FMDV-VP1-Ab. Cuando la reacción de la muestra es cromogénica, la profundidad del color es directamente proporcional a la cantidad de FMDV-VP1-Ab.el resultado es positivo cuando los resultados medidos por el lector ELISA superan el valor umbral establecido, lo que significa que la inmunidad ha producido anticuerpos o que existe una infección natural.

3.Los componentes del kit

4Materiales requeridos pero no proporcionados

1) Lector de microplacas (longitud de onda doble: 450/630 nm).

2) Micropipeta de precisión (un canal de 1 a 100 ul,0.5-10ul, multicanal 30-300ul)

3) Caja de temperatura constante o caja de baño de agua.

4) Oscilador.

5) Las puntas desechables (10ul, 200ul)

6) Agua desionizada

5Requisito de muestra

1) Las muestras son de suero porcino, que debe recogerse sin bacterias. El tiempo de almacenamiento debe ser inferior a 1 semana a 2-8 °C, si es a largo plazo, debe mantenerse a -20 °C.

2) Evite utilizar las muestras con hemólisis severa, precipitados, contaminados por bacterias o suspensión proteica.

6Preparación

1) Para obtener los mejores resultados, los reactivos de ELISA deben mantenerse a temperatura ambiente (20-25 °C) durante 30 minutos.

2) Diluir la muestra: diluir la muestra con el diluyente de la muestra a 40 veces. (por ejemplo: suero de 5ul + diluyente de la muestra de 195ul).

3) Preparación de la solución de lavado: diluir el tampón de lavado 10 × concentrado con agua desionizada 10 veces (por ejemplo:50 ml de tampón de lavado 10 × concentrado + 450 ml de agua desionizada) Es normal si hay cristalización en el tampón de lavado 10 × concentrado, poner a 37°C hasta que se disuelva por completo.

7Procedimiento

1) elAñadir muestra:Sacar las placas recubiertas necesarias (pueden separarse) según la cantidad de muestra y registrar la posición de la muestra en una hoja de trabajo.añadir suero de control negativo sin diluir, 2 pozos para el control positivo, añadir el suero de control positivo no diluido, 100μL/pozo (Está bien no establecer el control en blanco).

2) elIncubación:Mezclar suavemente, cubrir yIncubación a los 37 años°Cdurante 30 minutos.

3) elPlato de lavado:Retire el papel adhesivo. Verter el líquido fuera de los pozos, añadir el tampón de lavado diluido en cada pozo completamente, estar estático durante 10s, verter. Repita 3 veces, en la última vez pal para secar en papel absorbente.

4) elAñadir el conjugado de enzimas:Añadir 100 μL de enzima conjugada en cada pozo.

5) Las demásIncubación:Placa de cubierta con nueva lámina adhesiva.Incubación a los 37 años°Cdurante 30 minutos.

6) elPlato de lavado:Repita el paso 3.

7) elAñadir sustrato:Añadir sustrato 100ul en cada pozo, mezclar adecuadamente,Incubación durante 10 minutos a 37 °C°Cen la oscuridad.

8) elDetener la reacción:Añadir 50 μl de solución de parada en cada pozo, mezclar suavemente y determinar el resultado.

9)Lea los resultados:Se medirá el valor de OD de cada pozo con un lector ELISA a doble longitud de onda de 450 nm/630 nm.

8Resultados

Para que el ensayo sea válido, el valor medio de OD de los pozos de control positivo debe ser igual o superior a 0.6, y el valor medio de OD de los pozos de control negativos es inferior a 0.1De lo contrario, la prueba es inválida, necesitamos otra prueba.

El resultado se juzgará por el valor S/P,

S/P=(Muestra OD450/630- NCel número)/( PCel número- El NC.el número), NCel númerosignifica el valor medio de OD450/630 del control negativo, PCel númerosignifica el valor medio de OD450/630 del control positivo

Si S/P≥0.15, es positivo; menor que 0.15, es negativo.

9. Precauciones y advertencias para los usuarios

1Este kit de prueba es sólo para uso de investigación.

2No utilice reactivos caducados, no mezcle reactivos de lotes diferentes.

3Leer cuidadosamente el manual antes de usar.

4Los desechos de experimentación deben ser tratados con esterilización por vapor a alta presión a 121 °C durante 30 minutos, o tratados con desinfectante de hipoclorito de sodio de 5,0 g/l durante 30 minutos, y luego desechados.

5. La placa de micropozo retirado del ambiente refrigerado debe ser equilibrada humedad para secar a temperatura ambiente, luego se puede abrir.Colocar de nuevo la placa MicroWell no utilizada en una bolsa de papel seco y sellarla a 2 ~ 8 °CEl reactivo líquido no utilizado debe cubrir las tapas, almacenarse a 2-8 °C en la oscuridad con otros componentes del grupo.

6Se debe utilizar un Micropipettor para añadir la muestra y los reactivos, y a menudo probar su exactitud.

7Cuando se añade tampón de lavado, debe estar lleno pero sin desbordamiento, evitar la aparición de enzimas libres en la boca del pozo o la contaminación cruzada entre los pozos.

8La solución de stop es corrosiva, use una gran cantidad de agua para lavarse inmediatamente al tocar la piel o la ropa.

Especificaciones:96 pozos por 2.

Fecha de caducidad:- 12 meses. - ¿Qué es eso?

El almacenamiento:Conservar a una temperatura de entre 2 y 8 °C, en la oscuridad,No hay congelación.

Fecha de producción:En el embalaje exterior del kit de ensayo.

La empresa de biotecnología Shenzhen Lvshiyuan Co., Ltd.

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Tel. 86-755-28438788 El teléfono está en el teléfono.

Por fax 86-755-28938800

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