LSY-30036 Kit ELISA de brucelosis para animales para pruebas de anticuerpos contra la brucelosis

Kit ELISA de anticuerpos contra la brucelosis para bovinos, cabras, ovejas, camellos, cerdos y perros

No de catálogo LSY-30036

1. Introducción

El kit ELISA de anticuerpos contra la brucelosis se utiliza para evaluar los anticuerpos contra la brucelosis en suero de bovinos, cabras, ovejas, camellos, cerdos y perros, etc.

Este kit utiliza el método ELISA competitivo, el antígeno de Brucella abortus purificado está pre-revestido en tiras de micro-pozo de enzimas.,después de la incubación, si la muestra contiene un anticuerpo específico de la brucelosis, competirá con el anticuerpo en solución de trabajo de anticuerpos monoclonales para combinarse con el antígeno preencapsulado,desechar el anticuerpo no combinado y otros componentes mediante lavado; luego añadir el enzima conjugado, la enzima reacciona con el anticuerpo monoclonal que se une a la placa, desechar el enzima conjugado no combinado mediante lavado; añadir el sustrato TMB en micro pozos,la señal azul por catálisis enzimática es en proporción inversa del contenido de anticuerpos en la muestra, utilizar el lector ELISA a una longitud de onda de 450 nm para medir el valor de absorbancia OD en los pozos de reacción después de añadir la solución de parada para detener la reacción.

2. Reactivos y contenido

3. Material requerido no proporcionado

1) Micropipeta: 0,5ul-10ul, 10ul-100ul, 100ul-1000ul. El uso de la micropipeta para el tratamiento de las enfermedades de las personas con discapacidad es muy importante.

2) Las puntas de las pipetas desechables.

3) Graduado: 500 ml.

4) Lector de microplacas: 96 pozos.

5) Agua destilada o agua desionizada.

6) Lavadora de microplacas

4Preparación de las muestras

Tomar sangre animal entera, obtener suero mediante el uso de un método regular, el suero debe ser brillante y sin hemólisis

5.Preparación de amortiguador de lavado

Devuelva 10 veces el tampón de lavado concentrado a temperatura ambiente antes de su uso, si hay cristales de sal, agite para que se disuelva, luego diluya a 10 veces con agua destilada o agua desionizada.El amortiguador de lavado diluido puede almacenarse a 4°C durante aproximadamente 1 semana.

6.Preparación de solución de trabajo de anticuerpos monoclonales

Solución de trabajo de anticuerpos monoclonales: disolver el anticuerpo monoclonal liofilizado con 6 ml de tampón de lavado diluido para cada frasco cuando se use.

7.Las notas

1) Coloque todos los reactivos a temperatura ambiente antes de su uso, mantenga todos los reactivos a temperatura ambiente durante al menos 1 hora, agite uniformemente antes de su uso y conserve a 2-8°C después de su uso.

2) No mezcle los reactivos de uso de diferentes kits y de diferentes lotes, evitando que los reactivos se contaminen durante el uso.

3) El sustrato y la solución de parada pueden provocar irritación en la piel y los ojos, tenga cuidado al utilizar.

4) No exponga el sustrato a una luz fuerte y evite el contacto con el oxidante.

5) Las placas revestidas con Ag para la brucelosis deben estar selladas y a prueba de humedad.

6) Todos los desechos deben tratarse bien para evitar la contaminación antes de ser desechados.

7) El cumplimiento estricto de las instrucciones de operación puede obtener los mejores resultados.

8) elLas placas revestidas con Ag para la brucelosis son desechables, no se deben repetir.

8.Procedimiento de ensayo

1. Para cada ensayo, se establecerá un pozo para los controles positivos y dos pozos para los controles negativos.
2. Se añade diluyente de muestra a cada pozo de reacción, 45ul/pozo; luego se añade el control negativo, el control positivo y la muestra de suero en el mismo pozo, en consecuencia, 5ul/pozo;Luego añadir solución de trabajo de anticuerpos monoclonales a cada pozo, 50ul/pozo, agitar suavemente y mezclar uniformemente ((no mezclar con las puntas);
3. Cubrir la placa con papel adhesivo, incubar a(Sobre todo en±3) el°Cdurante 45 minutos;
4. Abrir la lámina adhesiva, desechar el líquido del pozo, añadir tampón de lavado diluido a cada pozo, 250ul/pozo, desechar el líquido, repetir el paso anterior durante 4-6 veces,al final, se seca con el papel absorbente;
5. Añadir el Enzima Conjugado, 100ul/pozo, cubrir la placa con papel adhesivo, incubar a(Sobre todo en±3) el°Cdurante 30 minutos;
6. Abrir la lámina adhesiva, desechar el líquido del pozo, añadir tampón de lavado diluido a cada pozo, 250ul/pozo, desechar el líquido, repetir el paso anterior durante 4-6 veces,al final, se seca con el papel absorbente;
7. Añadir sustrato, 100ul/pozo, mezclar uniformemente y luego cubrirlo con papel adhesivo,Incubaciónen (25±3) ela °C en la oscuridad durante 10 minutos;
8. Añadir solución de parada, 50ul/pozo para detener la reacción, medir el resultado en 10 minutos.

9Resultados del juicio

Se leerá el valor de la OD mediante el lector ELISA a 450 nm (630 nm como referencia).

Para que el ensayo sea válido:

El valor de OD del control negativo ((N) > 0.6, el valor de OD del valor positivo (P) / el valor medio de OD del control negativo ((N) < 0.3.

Método de cálculo:

PI ((tasa de bloqueo) = {1- (valor medio de la DO de la muestra/valor medio de la DO del control negativo) } x 100%

Interpretación de los resultados

PI (tasa de bloqueo) > 70%: Positivo

PI (tasa de bloqueo) ≤ 70%: negativo

10. Almacenamiento y fecha de caducidad

Conservar a una temperatura de 2 a 8°C en la oscuridad, sin congelación, fecha de caducidad: 12 meses.

La empresa de biotecnología Shenzhen Lvshiyuan Co., Ltd.

D Edificio, Parque industrial biológico nacional de la vida marina, No.2 Binhai Road, Dapeng, Shenzhen, China, 518120

Tel. 86-755-28438788 El teléfono está en el teléfono.

Por fax 86-755-28938800

El correo electrónico:Información sobre las medidas de seguridad

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