LSY-30038 ELISA de anticuerpos contra Toxoplasma gondii para kits de ensayo de toxoplasma de bovinos y ovinos

T.anticuerpos contra el oxoplasma gondiiLas pruebas de ELISAKit para el ganado bovino, ovejas   

No de catálogo LSY-30038

1. Uso

Este kit se utiliza para detectar anticuerpos contra Toxoplasma gondii (TOX) en suero de bovino y ovino.

2Principio.

Este kit utiliza el método ELISA indirecto, el antígeno TOX se recubre previamente en tiras de micro-pozo de enzimas.se combinará con el antígeno pre-revestido, desechar el anticuerpo no combinado y otros componentes con lavado; luego añadir el anticuerpo del virus anti-TOX etiquetado con enzimas, combinar con el complejo antigeno-anticuerpo específico;desechar el conjugado enzimático no combinado con el lavadoAñadir sustrato TMB en micro-pozos, habrá producto azul,utilizar el lector ELISA a una longitud de onda de 450 nm para medir el valor de absorbancia A en los pozos de reacción después de añadir la solución de parada para detener la reacción.

3. Reactivos

4.Materiales requeridos pero no suministrados

1) Micropipettores y puntas desechables: 0,5 μL~10 μL,10 μL~100 μL,100 μL~1000 μL

2) Las puntas de las pipetas desechables

3) Botella de medición: 500 ml

4) Lector de microplacas de 96 pozos

5) Agua destilada o agua desionizada

6) Lavadora de botellas o microplacas

5Preparación de las muestras

Tomar sangre animal entera, hacer suero de acuerdo con los métodos regulares, el suero debe ser transparente, no tienen hemólisis.

6. Preparación del tampón de lavado

Antes de usar, devuelva la solución de lavado a temperatura ambiente, si hay cristales salados, agite para que los cristales se disuelvan, luego use agua destilada o agua desionizada para diluirla 10 veces.La solución de lavado diluida puede conservarse durante una semana a 4 °C.

7. Dilución de la muestra

En el plato de dilución del suero, diluir el suero a 1:99 con dilución de la muestra (por ejemplo: 495μL de diluyente de muestra + 5μL de suero))

Nota: el control negativo y el control positivo no necesitan diluir. Cambiar la punta después de tomar la muestra cada vez, registrar la situación de la muestra en la placa con precisión.Agitar uniformemente la muestra antes de agregarla.

8. Notas

1) Todos los reactivos deben ajustarse a temperatura ambiente y agitarse uniformemente antes de su uso, conservarse a 2-8 °C después de su uso.

2) No intercambiar los reactivos de los kits de diferentes números de lotes para su uso.

3) El sustrato y la solución de parada pueden ser excitantes para la piel y los ojos, tenga cuidado al usar.

4) No exponga el TMB (Substrato B) a la luz y evite su contacto con antioxidantes.

5) Los pozos deben evitar la humedad o el contacto con el agua después de la apertura (Ponga la microplaca no utilizada de nuevo en el saco con deshidratador a 2 ~ 8 °C pronto)

6) Tratar todos los desechos razonablemente antes de verterlos para evitar la contaminación.

7) Siga estrictamente las instrucciones para obtener el mejor resultado. Todos los procedimientos, incluida la pipetación, el tiempo y el lavado, etc., deben ser precisos.

8) La placa de dilución del suero es desechable, no se utilice por segunda vez; su volumen máximo es de 300 μL/pozo.

9Procedimiento ELISA

1) Se toma una microplaca pre-revestida (puede descifrarse durante varios usos según la cantidad de muestra), se añade 100 μL de suero diluido a un pozo, mientras se ponen 2 pozos para el control negativo,1 pozo para los pozos de control positivo por separado. añadir 100 μl de control negativo/positivo a sus pozos. agitar suavemente (no derramar),Incubación a los 37 años°Cdurante 30 minutos.

2) Despeje el líquido de los pozos, añada 250 μl de solución de lavado diluida a cada pozo, derrame. Repita 4-6 veces, luego golpee para secar en papel absorbente.

3) Añadir 50 μL de enzima conjugada a cada pozo, yIncubación a los 37 años°Cdurante 30 minutos.

4) Repita el paso 2 (lavado).

5) Añadir 100 μL de sustrato a cada pozo, mezclar adecuadamente,reaccionar durante 10 minutos a 37°C En elEs oscuro.

6) Añadir 50 μL de solución de parada en cada pozo y medir el resultado en 10 min.

10.Resultados

Leer el valor de la DO con el lector ELISA a 450 nm (630 nm como referencia).

Para que el ensayo sea válido:

El valor de OD del control negativo (N) < 0.15, mientras que el valor de OD del control positivo (P) > 0.5

Enjuiciamiento del resultado

Si el valor de la muestra A450 es superior a 0,25+ absorbancia media del control negativo, se considera positivo; y si es inferior a 0,25, negativo. Si la absorbancia media del control negativo es inferior a 0.05, se calculará como 0.05

Especificaciones:96 pozos por equipo.

Fecha de caducidad:- 12 meses. - ¿Qué es eso?

El almacenamiento:Almacenamiento a 2-8°C, en la oscuridad.