Kit de prueba ELISA de anticuerpos del virus de la fiebre aftosa (FMDV) tipo O

Kit ELISA competitivo para la detección de anticuerpos del virus de la fiebre aftosa tipo O

No de catálogo LSY-30031

1. Uso

Se utiliza para la detección de anticuerpos contra la fiebre aftosa de tipo O en suero de cerdos, bovinos y cabras.

2.Principio

Este kit adopta el método ELISA competitivo de fase sólida, que es uno de los métodos designados por la OIE para el examen serológico de la fiebre aftosa en el comercio internacional,y es también el método de referencia para la evaluación del efecto inmunológico de la vacuna contra la fiebre aftosa en China.

La placa de ELISA fue recubierta con el antígeno de la proteína recombinante FMDV-O VP1 y el anticuerpo monoclonal de la proteína anti-VP1 fue utilizado como etiqueta de la enzima.y luego añadir el anticuerpo monoclonal etiquetado con la enzimaSi hay anticuerpos específicos de la FMDV-O en el suero a analizar, competirán con el marcador enzimático del antígeno en la placa recubierta, y los componentes no unidos se eliminarán.el color es claro o no tiene color después de añadir el sustrato. Por el contrario, el color era más oscuro después de agregar el sustrato. Utilice un lector de microplacas para medir el valor de OD450nm y determine los resultados experimentales de acuerdo con la fórmula de cálculo.

3Los componentes del kit

4Materiales requeridos pero no proporcionados

1) Lector de microplacas (longitud de onda única: 450 nm).

2) Micropipeta de precisión (un canal de 1 a 100 ul,0.5-10ul, multicanal 30-300ul)

3) Caja de temperatura constante o caja de baño de agua.

4) Oscilador.

5) Las puntas desechables (10ul, 200ul)

6) Agua desionizada

5Requisito de muestra

Tratar de utilizar muestras de suero recién recogidas; no se puede utilizar para detectar muestras con contaminación grave o hemólisis; si la muestra de suero es turbia,tomar el supernatante después de la centrifugación para su detección; La muestra de ensayo puede almacenarse a 2 ~ 8 °C durante 5 días. Si se almacena durante mucho tiempo, debe transferirse a - 20 °C o a una temperatura inferior.

6Preparación

Para obtener los mejores resultados, los reactivos de ELISA deben mantenerse a temperatura ambiente (25 ± 3 °C) durante al menos 30 minutos.

2) Preparación del amortiguador de lavado: diluir el amortiguador de lavado 10 × concentrado con agua desionizada 10 veces (por ejemplo: 10 ml de amortiguador de lavado 10 × concentrado + 90 ml de agua desionizada).

7Procedimiento

1) de las siguientes directivas:Añadir muestra: añadir 50 μL de suero de control negativo (NC) y 50 μL de suero de control positivo (PC) a los pozos de control; añadir primero 30 μL de diluyente de muestra a los pozos de muestra, y luego 20 μL de suero a cada pozos;añadir 50 μL de enzima conjugada a cada pozo, agitar suavemente para mezclar (no derramar), cubrir con película de sellado e incubar a 37°C durante 30 min.

2) y otros).Lavar el plato: desechar el líquido en el pozo, añadir 300 μl de amortiguador de lavado diluido a cada pozo y lavar tres veces.Está estrictamente prohibido que la placa del pozo se seque entre pasos..

3) y de las demás.Añadir el substrato: Añadir 50 μL de sustrato a cada pozo, mezclar suavemente, cubrir con película de sellado e incubar a 37°C durante 15 min en la oscuridad.

4) y de la Comisión.Terminado: Añadir 50 μL de solución de parada a cada pozo, agitar durante 10 segundos, mezclar bien y leer después de terminado.

5) y el artículo 5 del Reglamento.Lectura: Utilice un lector de microplacas para medir el valor de densidad óptica (valor OD) a una longitud de onda de 450 nm.

8.Resultados

1. Para que el ensayo sea válido, el valor medio de OD del control positivo < 0.4, el valor medio de la DO del control negativo > 0.6.
2. Método de cálculo: OD_{No incluido}Valor medio = (DO)_{Las demás:}+OD_{En el caso de los vehículos de motor}) /2
3. Formula para el cálculo del valor S/N de la muestra: S/N=valor OD/OD de la muestra_{No incluido}Valor medio
4. La norma de juicio es S/N<0.5, evaluado como positivo; S/N≥0.5, se ha evaluado como negativo.

9. Precauciones y advertencias para los usuarios

1) Lea cuidadosamente el Manual antes de usarlo.

2) No utilice reactivos caducados, no mezcle reactivos de lotes diferentes.

3) Los desechos de experimentación deben ser tratados con esterilización por vapor a alta presión a 121 °C durante 30 minutos, o tratados con desinfectante de hipoclorito de sodio de 5,0 g/l durante 30 minutos, y luego desechados.

4) La placa MicroWell retirada del ambiente refrigerado debe estar equilibrada con humedad para secarse a temperatura ambiente, luego puede abrirse.Colocar de nuevo la placa MicroWell no utilizada en una bolsa de papel seco y sellarla a 2-8 °CEl reactivo líquido no utilizado debe cubrir las tapas, almacenarse a 2-8 °C en la oscuridad con otros componentes del grupo.

5) Debe utilizar un micropipettor para añadir la muestra y los reactivos, y a menudo probar su exactitud.

6) Cuando se añade tampón de lavado, debe estar lleno pero sin desbordamiento, evitar la aparición de enzimas libres en la boca del pozo o la contaminación cruzada entre los pozos.

7) Si la solución es corrosiva, use una gran cantidad de agua para lavarse inmediatamente al tocar la piel o la ropa.

Especificaciones:96 pozos por 2.

Fecha de caducidad:- 12 meses. - ¿Qué es eso?

El almacenamiento:Conservar a una temperatura de entre 2 y 8 °C, en la oscuridad,No hay congelación.

Fecha de producción:En el embalaje exterior del kit de ensayo.

La empresa de biotecnología Shenzhen Lvshiyuan Co., Ltd.

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El correo electrónico:Información sobre las medidas de seguridad

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