kit elisa asf de prueba de anticuerpos para el virus de la peste porcina africana de primavera verde 2 placas por embalaje

Primavera Verde africanaAnticorpos contra el virus de la peste porcina BloqueoLas pruebas de ELISA(b-ELISA)El kit

No de catálogo LSY-30048

1.Breve yUtilización

La peste porcina africana (PPA) es una infección grave, aguda y altamente contagiosa de los cerdos causada por el virus de la peste porcina africana (VPA).hemorragia severa de los órganos internosEste kit, basado en la expresión del antígeno VP72 y el anticuerpo monoclonal de especificidad (McAb), se utiliza para evaluar la eficacia de los fármacos contra el VIH.por el que se adopta el ensayo inmunosorbente de bloqueo ligado a enzimas (b-ELISA), equipado con una gama completa de reactivos y materiales de diagnóstico, una caja puede detectar 92 piezas de suero (o parcial) según las circunstancias,puede utilizarse en la detección de anticuerpos contra la peste porcina africana, alta sensibilidad, alta especificidad, repetibilidad y las características del kit en sí sin infectividad.

Bloqueo del ensayo inmunosorbente ligado a enzimas ((b-ELISA) para la detección de anticuerpos específicos del virus de la peste porcina africana en muestras de suero porcino.

2Principio.

Los anticuerpos específicos del suero a analizar bloquean la unión del ASFV y McAb. Añadir el suero a analizar en el orificio de la placa enzimática de 96 pozos recubierto con antígeno de proteína recombinante del ASFV.Si hay anticuerpos específicos de ASFV en el suero a analizarDespués de bloquear, añadir la reacción de unión de anticuerpos monoclonales específicos de la enzima y el antígeno.El anticuerpo monoclonal específico de la enzima no unido se eliminará y no aparecerá ningún color después de añadir el sustrato.Por el contrario, si no hay anticuerpos específicos de ASFV en el suero a analizar, se producirá un desarrollo de color después de añadir el sustrato.Se midió el valor OD del reactivo mediante un instrumento de etiquetado enzimático., se calculó la velocidad de bloqueo y se determinaron los resultados de los ensayos.

3.Los componentes del kit

4Preparación

1) Para obtener los mejores resultados, los reactivos de ELISA deben mantenerse a temperatura ambiente (20-25 °C) durante al menos 30 min. La microplaca debe volver a temperatura ambiente y secarse antes de abrir el envase.

2) Diluir la muestra: diluir la muestra con la solución del diluyente de la muestra a 10 veces. ((10ul de suero + 90ul de solución del diluyente de la muestra), la muestra diluida debe mezclarse uniformemente para obtener mejores resultados.Los controles negativos y positivos no necesitan diluir, añadirlo directamente para ensayo.

3) Preparación del amortiguador de lavado: diluir el amortiguador de lavado 10 × concentrado con agua desionizada 10 veces (por ejemplo:1 ml 20 × tampón de lavado concentrado + 9 ml de agua desionizada) Hacer que los cristales se disuelvan completamente antes de su usoEl amortiguador de lavado diluido puede almacenarse durante 7-10 días a 2~8°C.

5.Procedimiento

• Se extraen las placas recubiertas (pueden separarse) y se registra la posición de la muestra en una hoja de cálculo.2 pozos para el suero de control positivo, añadir suero de control positivo no diluido, 100μL/pozo.
• Mezclar suavemente, cubrir yIncubación a los 37 años°Ccaja húmedapara60 minutos.
• Retire el papel adhesivo. Verter el líquido de los pozos, añadir el tampón de lavado diluido en cada pozo completamente, luego verter directamente. Repita 6 veces, en la última vez golpear para secar en el papel absorbente.
• Añadir 100μL de enzima monoclonal conjugada de ASFV en cada pozo, mezclarlo suavemente.
• Placa de cubierta con papel adhesivo.Yo...Incubado en 37 °C caja húmedapara45Min.
• Repita el paso 3 (lavado).
• Añadir sustrato 100ul en cada pozo, mezclar adecuadamente,Incubación durante 10Min en37 °Cen la oscuridad.
• Añadir 50 μl de solución de parada en cada pozo, mezclar suavemente y determinar el resultado.
• Se medirá el valor OD de cada pozo con un fotómetro a doble longitud de onda de 450 nm/630 nm.

6.Resultados

Para que el ensayo sea válido, el valor OD de los pozos de control negativo debe ser mayor o igual a 1.0, y el valor de OD de los pozos de control positivo es inferior a 0.5De lo contrario, la prueba es inválida, necesitamos otra prueba.

Calcular la tasa de bloqueo ((%) como sigue:

La tasa de bloqueo ((%)=[(Valor medio de OD del control negativo- Valor medio de OD de la muestra) /Valor medio de OD del control negativo]x100%

Si la tasa de bloqueo ((%) ≥ 50%: es anticuerpo ASFV positivo;

Tasa de bloqueo ((%) < 45%: es anticuerpo ASFV negativo;

45%≤Tasa de bloqueo ((%) < 50%, la muestra de suero tiene sospechas de anticuerpos contra el ASFV, debe volver a comprobar; vuelva a analizar la muestra de suero, si el resultado sigue siendo 45%≤Tasa de bloqueo ((%) < 50%,Entonces juzgarlo como anticuerpo ASFV positivo.

7. Precauciones y advertencias para los usuarios

1) Este kit es un producto piloto. Número de lote y fecha de caducidad, véase la etiqueta de la caja y las instrucciones, no use el kit con fecha de caducidad.

2) El kit debe almacenarse a 2 ~ 8 °C, la vida útil es de 12 meses;

Leer cuidadosamente el manual antes de usar.

4) Todos los componentes del kit deben mantenerse a temperatura ambiente durante 30 minutos antes de su uso.

5) La placa revestida es una placa ELISA desmontable, que puede desmontarse y utilizarse varias veces. La banda revestida restante debe sellarse para evitar la humedad.

6) Después de añadir la muestra, debe mezclarse uniformemente. Cada muestra debe utilizar una nueva punta de pipeta para evitar la contaminación cruzada.

7) Lavar bien.

8) El tiempo de detección se controlará estrictamente y cada paso de operación será compacto.

9) Después de la terminación, el valor de la OD se medirá en un plazo de 30 minutos para evitar cambios de color.

10) El suero a analizar puede diluirse un día antes del experimento y permanecer durante la noche a 4°C.

11) No exponga el sustrato a una luz fuerte y evite el contacto con el oxidante.

Especificaciones:96 pozos.

Fecha de caducidad:- 12 meses. - ¿Qué es eso?

El almacenamiento:Conservar a una temperatura de entre 2 y 8 °C, en la oscuridad,No congelado.

Fecha de producción:En el embalaje exterior del kit de ensayo, utilice el kit durante la fecha de caducidad.