Kit ELISA para el diagnóstico de la peste de las pequeñas personas Reactivos de detección de anticuerpos PPR 2 placas

Kit ELISA de anticuerpos contra el virus de la peste de los pequeños rumiantes

No de catálogo LSY-30035

1.Utilización

Se utiliza para la detección cualitativa de anticuerpos contra el PPRV en suero y plasma de ovejas y cabras,evaluar el estado inmunológico de la vacuna Peste des petits ruminants y el diagnóstico serológico asistido de los animales infectados.

2Principio.

Este kit utiliza el método ELISA de competencia, el antígeno PPRV se recubre previamente en tiras de micro-pozo de enzimas.si hay anticuerpos específicos del virus PPR, se unirá al antígeno del PPRV en la placa de recubrimiento e impedirá que el anticuerpo monoclonal etiquetado por la enzima se une al antígeno en la placa; por el contrario,si la muestra no contiene anticuerpos específicos del PPRVDespués de lavar para eliminar el anticuerpo no unido y otros componentes, añadir sustrato a los microagujeros para formar un producto azul mediante catálisis enzimática.Después de añadir la solución de parada para terminar la reacción, utilizar un lector de microplacas a 450nm/630nm de doble longitud de onda para medir el valor de absorbancia A en el pozo de reacción.

3.Los componentes del kit

4.El matel airer yno equidadopel mismo.d

1) Micropipeta: 0,5-10ul, 10ul-100ul, 100ul-1000ul. El uso de la micropipeta para el tratamiento de las enfermedades de las personas con discapacidad es muy importante.

2) Las puntas de las pipetas desechables.

3) Graduado: 500 ml.

4) Lector de microplacas: 96 pozos con longitud de onda de 450/630 nm.

5) Agua destilada o agua desionizada.

6) Lavadora de microplacas

5Muestrapreparación

Toma sangre animal entera, toma suero usando el método normal, el suero debe ser brillante y sin hemólisis.

6.Preparación de amortiguador de lavado

Si hay cristales de sal, póngalo en un baño de agua a 37°C durante 5 a 10 minutos para disolverlo.luego diluirlo con agua desionizada a 10 veces (por ejemplo, para preparar 200 ml de amortiguador de lavado: 180 ml de agua desionizada + 20 ml de amortiguador de lavado concentrado 10X, mezclarlo uniformemente).

• Las notas

1) Coloque todos los reactivos a temperatura ambiente antes de su uso, mantenga todos los reactivos a temperatura ambiente durante al menos 30 minutos, agite uniformemente antes de su uso y conserve a 2-8°C después de su uso.

2) No mezcle los reactivos de uso de diferentes kits y de diferentes lotes, evitando que los reactivos se contaminen durante el uso.

3) El sustrato y la solución de parada pueden provocar irritación en la piel y los ojos, tenga cuidado al utilizar.

4) No exponga el sustrato a una luz fuerte y evite el contacto con el oxidante.

• Las placas revestidas con PPRV-Ag deben estar selladas y a prueba de humedad.
• Todos los desechos deben tratarse bien para evitar la contaminación antes de ser desechados.
• El cumplimiento estricto de las instrucciones de operación puede obtener los mejores resultados.

• Procedimiento de ensayo

1) Tomar la microplaca pre-revestida (según el número de muestras, puede desmontarse y utilizarse por separado), establecer 2 pozos para el control positivo, 2 pozos para el control negativo,añadir 50μl de suero de control positivo o de suero de control negativo a la misma cantidad de dependienteLos otros son pozos de muestreo, primero se añade 40 μl de dilución de la muestra, luego se añade 10 μl de muestra en cada pozos.cubrir la placa con papel adhesivo,Incubacióna 37 °C para30minutos;

2) Abrir la lámina adhesiva, desechar el líquido del pozo, añadir tampón de lavado diluido a cada pozo, 300ul/pozo, estar estático durante 30s, luego desechar el líquido, repetir el paso anterior durante 5 veces,al final, se seca con el papel absorbente;

3) Añadir la solución de sustrato, 100ul/pozo, mezclarla uniformemente y luego cubrirla con papel adhesivo.Incubacióna 37 °Cen la oscuridadpara15minutos;

4) Añadir solución de parada 50ul/pozo para detener la reacción, medir el resultado en 10 minutos.

9.REl Tribunal de Justicia

Se leerá el valor de la OD con el lector ELISA a 450 nm (630 nm como referencia).

Para que el ensayo sea válido:

Valor de OD del control negativo (N) ≥ 1.0,

El valor de OD del control positivo (P) ≤ 0.3;

Método de cálculo:

Valor de la DO de la muestra/valor medio de la DO del control negativo (N) = valor S/N

Resultadosla interpretación

Valor S/N ≥ 0.5- No.

Valor S/N < 0.5: Positivo

10.Fecha de almacenamiento y fecha de caducidad

Conservar a una temperatura de 2 a 8°C en la oscuridad, sin congelación, fecha de caducidad: 12 meses.