Equipo del anticuerpo ELISA del gondii del toxoplasma LSY-30038 para los bóvidos, oveja

Equipo del anticuerpo ELISA del gondii del toxoplasma para los bóvidos, oveja

No. LSY-30038 del catálogo

1. Uso

Este equipo se utiliza para detectar el anticuerpo del gondii del toxoplasma (TOX) en los bóvidos, suero de las ovejas.

2. Principio

Este equipo utilizar el método indirecto de ELISA, antígeno de TOX se cubre primero en tiras micro-bien de la enzima. Al probar, añada la muestra diluida del suero, después de la incubación, si hay anticuerpo específico de TOX, él combinará con el antígeno cubierto primero, desechar el anticuerpo sin combinar y otros componentes con el lavado; entonces añada el anticuerpo anti-TOX etiquetado enzima del virus, cosechadora con el complejo específico del antígeno-anticuerpo; deseche la conjugación sin combinar de la enzima con el lavado; Añada el substrato de TMB en micro-pozos, allí sea producto azul, utilice al lector de ELISA en la longitud de onda 450nm para medir la absorción un valor en pozos de la reacción después de añadir la solución de la parada para parar la reacción.

3. reactivo

4. Materiales requeridos pero no proporcionados

1) Micropipettors y extremidades disponibles: 0.5μL~10μL, 10μL~100μL, 100μL~1000μL

2) Extremidades disponibles de la pipeta

3) Cilindro graduado: 500 ml

4) lector del microplate de 96 pozos

5) Agua destilada o agua deionied

6) Botella o lavadora del microplate

5. Preparación de la muestra

Tome la sangre entera animal, haga el suero según métodos regulares, el suero debe estar claro, no tiene ninguna hemólisis.

6. preparación del almacenador intermediario que se lava

La solución que se lava de vuelta a la temperatura ambiente antes de usar, si hay cristales salados, sacude para hacer que los cristales disuelven, después utiliza el agua destilada o el agua deionied para diluirla en 10 veces. La solución que se lava diluida puede almacenar para 1 semana en el ℃ 4.

7. Dilución de la muestra

En la placa del dilución del suero, suero diluído en el 1:99 con el dilución de la muestra (por ejemplo: diluyente de la muestra 495μL + suero 5μL)

Aviso: El control negativo y el control positivo no necesitan diluído. Extremidad del intercambio después de recoger la muestra cada vez, expediente la situación de la muestra en la placa exactamente. Sacuda la muestra uniformemente antes de añadirla.

8. Notas

1) Todos los reactivo deben ser ajustados a la temperatura ambiente y sacudir uniformemente antes de usar, tienda en el ℃ 2-8 después de usar

2) No intercambie los reactivo de los equipos de diversos números de lote para utilizar. Evite la contaminación el reactivo al usar.

3) La solución del substrato y de la parada puede tener excitante a la piel y los ojos, prestan la atención al usar.

4) No exponga TMB (substrato B) para encenderlo y para evitar contacto con los antioxidantes.

5) Los pozos deben evitar el agua húmeda o conmovedora después de unsealing (ponga O.N.U-usando microplate de nuevo a bolso con el deshidratador en el ℃ 2~8 pronto)

6) Trate toda la basura razonable antes de descargar para evitar la contaminación.

7) Adhiérase estrictamente a la instrucción de conseguir el mejor resultado. Todo el procedimiento incluyendo medir con una pipeta, medir el tiempo y lavar del etc. debe ser exacto.

8) La placa del dilución del suero está disponible, no utiliza por la segunda vez; el volumen del max de él es 300μL/well.

9. Procedimiento de ELISA

1) Tome el microplate cubierto primero (puede unseal para varios uso del tiempo según cantidad de la muestra), añaden 100μL diluyó el suero a un pozo, mientras tanto fijan 2 pozos para el control negativo, 1 pozo para los pozos positivos del control por separado. Añada la negativa de 100 μL/el control positivo a sus pozos. Sacuda suavemente (no se derrame), incube en el℃ 37 para 30 mínimos.

2) Vierta el líquido fuera de los pozos, añada la solución que se lava diluida 250 μL a cada pozo, vierta. Repita 4-6 veces, después acaricíelas para secarse en el papel absorbente.

3) Añada la conjugación de la enzima de 50 μL a cada pozo, e incube en el℃ 37 para 30 mínimos.

4) Repita el paso 2 (lavado). Recuerde la palmadita para secarse en el papel absorbente en el último.

5) Añada el substrato de 100 μL a cada pozo, mézclese correctamente, reaccione para el minuto 10 en el℃ 37 en oscuridad.

• Añada la solución de la parada de 50 μL en cada pozo, y mida el resultado dentro de 10 mínimos.

10. resultados

Valor leído del OD con ELISA Reader en 450nm (630nm como referencia).

Para que la prueba sea válida:

Valor del OD del control negativo (n) <0> 0,5

Juicio del resultado

Si el valor del A450 de la muestra es mayor de 0,25+ absorciones del medio negativo del control, se juzga para ser positivo; y si menos de 0,25, negativa. Si la absorción del medio negativo del control es menos de 0,05, calcule como 0,05

Especificaciones: 96 pozos/equipo.

Fecha de vencimiento: 12 meses.

Almacenamiento: Almacenando en 2-8℃, en la oscuridad.

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