Tipo porcino del virus de la fiebre aftosa LSY-30037 (FMDV) un anticuerpo ELISA Kit

Tipo porcino del virus de la fiebre aftosa (FMDV) un anticuerpo ELISA Kit

No. LSY-30037 del catálogo

1. Uso

El tipo porcino del ^® FMDV de GreenSpring al equipo de ELISA Test del anticuerpo se utiliza para la detección de tipo porcino de la fiebre aftosa un anticuerpo en suero porcino; evaluación de las condiciones de la inmunidad contra FMD porcino en la granja de cerdo e investigación de la epidemiología del FMD porcino.

2. Principio

Este equipo de la prueba se basa en el principio del análisis enzima-ligado sólido-fase del inmunosorbente (ELISA), consistiendo en la placa de la reacción del microwell cubierta con la proteína estructural VP1 del tipo A del cerdo FMD, el anti-cerdo peroxidasa-etiquetado rábano picante IgG y otros reactivo. El mecanismo de la reacción es la cosechadora cubierta con FMDV-A-VP1-Ab en la muestra, entonces cosechadora del antígeno con el anti-cerdo etiquetado enzima IgG para formar un complejo de “antigen+FMDV-A-VP1-Ab+ cubierto enzima-etiquetó el anticuerpo de IgG del anti-cerdo”, añade el substrato, color aparece por la reacción de la catálisis de la enzima. La intensidad del color es directamente proporcional a la cantidad de FMDV-A-VP1-Ab. Cuando la reacción de la muestra es cromogénica, el resultado es positivo cuando los resultados medidos por el lector de ELISA exceden el valor de umbral determinado, así que significa que la inmunidad ha producido los anticuerpos o existe la infección natural.

3. Los componentes del equipo

4. Materiales requeridos pero no proporcionados

1) Lector de Microplate (longitud de la doble-onda: 450/630 nanómetro).

2) Micropipeta exacta (1-100ul monocanal, 0.5-10ul, 30-300ul de varios canales)

3) Caja de la temperatura constante o caja del baño de agua.

4) Oscilador.

5) Extremidades disponibles (10ul, 200ul)

6) Agua desionizada

5. Requisito de la muestra

1) Las muestras son el suero porcino, que se debe recoger sin bacterias. El tiempo de almacenamiento debe ser menos de 1 semana en el ℃ 2-8, si para el largo plazo, debe ser guardado en -20℃.

2) Evite para utilizar las muestras con la hemólisis severa, precipitado, contaminado por las bacterias o la suspensión de la proteína.

6. Preparación

1) Traiga los reactivo de ELISA a la temperatura ambiente (℃ 20-25) para que el minuto 30 consiga los mejores resultados. Microplate debe volver a la temperatura ambiente y seco antes de paquete abierto.

2) Muestree diluído: Muestra diluída con el diluyente de la muestra en 40 veces. (por ejemplo: diluyente del suero 5ul + de la muestra 195ul).

3) Preparación de la solución que se lava: Diluya el almacenador intermediario del lavado 20×concentrated con agua desionizada en 20 veces. (por ejemplo: almacenador intermediario del lavado de 50ml 20×concentrated + agua desionizada 950ml) es normal si hay cristalización en el almacenador intermediario del lavado 20×concentrated, puesto en 37℃ hasta disuelto totalmente.

7. procedimiento

1) Añada la muestra: Saque las placas revestidas necesarias (puede ser separado) según cantidad de la muestra y registrar la posición de la muestra respecto a una hoja de trabajo. Al probar, los pozos del sistema 2 para el control negativo, añaden el suero negativo no diluido del control, 2 pozos para el control positivo, añaden el suero positivo no diluido del control, 100μL/well (no es MUY BIEN fijar control en blanco). Otros son pozos de la muestra, añaden la muestra diluida, 100μL cada uno.

2) Incubación: Mézclese suavemente, cubra e incube en el℃ 37 para 30 mínimos.

3) Placa que se lava: Quite la hoja adhesiva. Vierta el líquido fuera de los pozos, añada el almacenador intermediario que se lava diluido en cada pozo completamente, sea estático para 10s, vierta. Repita 3 veces, en la palmadita de la última vez de secarse en el papel absorbente.

4) Añada la conjugación de la enzima: Añada la conjugación de la enzima 100μL en cada pozo.

5) Incubación: Tapadera con la nueva hoja adhesiva. Incube en el ℃ 37 para 30 mínimos.

6) Placa que se lava: Repita el paso 3.

7) Añada el substrato: Añada el substrato 100ul en cada pozo, mézclese correctamente, incube para el minuto 10 en el ℃ 37 en oscuridad.

8) Pare la reacción: Añada la solución 50μL en cada pozo, mezcla de la parada suavemente y determinar el resultado.

9) Resultados leídos: Mida el valor del OD de cada pozo con un lector de ELISA en la longitud 450nm/630nm de la dual-onda.

8. resultados

Para que el análisis sea válido, el valor medio del OD de los pozos positivos del control debe ser mayor o igual 0,6, y el valor medio del OD de los pozos negativos del control es menos de 0,1. Si no la prueba es inválida, prueba de la necesidad otra vez.

El resultado es juzgado por valor de S/P,

S/P= (muestra OD450/630- NCx (—))/(PCx (—) - NCx (—)), NCx (—) significa el valor medio OD450/630, PCx del control negativo (—) significa el valor medio OD450/630 del control positivo

Si S/P≥0.2, él es positivo; menos de 0,2, es negativo.

9. precauciones y advertencias para los usuarios

1. Este equipo de la prueba está para el uso de la investigación solamente.

2. No utilice los reactivo expiró, no mezclan los reactivo de diversas porciones.

3. Lea el manual cuidadosamente antes de usar.

4. Los desperdicios del experimento se deben ocupar de la esterilización de alta presión del vapor en el ℃ 121 por 30 minutos, o tratar con el desinfectante del hipoclorito de sodio 5.0g/L para 30 minutos, después el descarte.

5. La placa de MicroWell quitada del ambiente refrigerado debe ser humedad equilibrada a secarse en la temperatura ambiente, después puede ser abierta. Ponga la placa inusitada trasera de MicroWell en bolso seco de la hoja y la selló en el ℃ 4. El reactivo líquido inusitado debe cubrir los casquillos, tienda en el ℃ 2-8 en oscuridad con otros componentes del grupo.

6. Debe utilizar Micropipettor para añadir la muestra y los reactivo, e impermeabiliza a menudo su exactitud.

7. Al añadir el almacenador intermediario del lavado, debe ser lleno pero ningún desbordamiento, evitar la enzima libre que aparece en la boca de la contaminación bien o cruzada entre los pozos.

8. Pare la solución es corrosivo, utiliza una gran cantidad de agua para lavarse inmediatamente cuándo tocar la piel o la ropa.

Especificaciones: 96 wells×2.

Fecha de vencimiento: 12 meses.

Almacenamiento: Tienda en 2~8℃, en la oscuridad, congelando no.

Fecha de producción: En el externo-embalaje del equipo de la prueba.