Equipo del anticuerpo ELISA de Pleuropneumoniae del actinobacillus (APP) ApxIV para los cerdos

Equipo del anticuerpo ELISA de Pleuropneumoniae del actinobacillus (APP) ApxIV para los cerdos

No. LSY-30040 del catálogo

• Uso y principio

Este immunoensayo enzima-ligado indirecto del uso del equipo (ELISA indirecto) para detectar el anticuerpo específico de Pleuropneumoniae del actinobacillus (APP) ApxIV en suero o plasma de los cerdos. Aplicable a la diagnosis diferenciada del actinobacillus Pleuropneumoniae infectó cerdos y vacunas desactivadas o cerdos inmunes de las vacunas de la subunidad.

Si hay anticuerpo de Pleuropneumoniae del actinobacillus (APP) ApxIV en muestra, combinará con el antígeno revestido de Pleuropneumoniae del actinobacillus (APP) ApxIV en la placa y la conjugación de la enzima añadió en el segundo paso. La coloración de la conjugación anti-porcina de la enzima en la placa con el substrato reflejará si la muestra está infectada con el actinobacillus Pleuropneumoniae (APP).

• Reactivo y contenido

3. El material requerido no proporcionó

1) Lector de Microplate con 450nm y 630nm

2) dispositivo termostático de 37 ℃

3) Micropipetas, ajustables.

4. Requisito de la muestra

1) Este equipo usado solamente a probar el suero o el plasma porcino.

2) Para conseguir el mejor resultado de la prueba, evite usar la muestra con la hemólisis severa, precipitado, contaminado por las bacterias o la suspensión de la proteína.

3) La muestra del suero puede almacenarlo en el ℃ 2-8 para a corto plazo (en 3 días), si para el largo plazo, debe ser guardada en -20℃ o bajar, evitar la congelación repetida y el deshielo.

5. Método de prueba

1) Preparación de la solución que se lava: Solución diluída del lavado 10X con agua destilada o agua desionizada en el 1:10 (por ejemplo: tome la solución del lavado de 100ml 10X, añada el agua destilada 900ml o el agua, la mezcla desionizadas), lo mezclan uniformemente para conseguir la solución que se lava.

2) Muestra diluída y que añade la muestra: La muestra diluída del suero con el dilución de la muestra en el 1:40, añade solamente la muestra diluida del suero para muestrear los pozos, 100ul/well. Si la placa del dilución del suero del uso para diluir la muestra, mothed está siguiendo tan: añada el dilución de la muestra 195ul en la placa del dilución de la muestra, después añada 5ul el suero, pipetas del uso para soplar y revolver para mezclarlo uniformemente, entonces tome la solución 100ul en los pozos de la muestra. (Nota: la placa del dilución del suero está disponible, no repite uso.)

3) Adición de controles: El control negativo y el control positivo no necesitan lo diluyen, añaden directamente. Fijado 2 pozos para el control en blanco, añada solamente el dilución de la muestra 100ul a cada pozo; 2 pozos para el control negativo, añaden solamente el control negativo 100ul a cada pozo; 2 pozos para el control positivo, añaden solamente el control positivo 100ul a cada pozo. La tapadera con la hoja adhesiva, incuba en oscuridad en el ℃ 37 por 30 minutos.

4) Placa que se lava: deseche el líquido del pozo, llene por completo (añadir 250ul/well si usando la lavadora) de la solución que se lava a cada pozo, lavándose por 3 veces, sea estático para 1 minuto para cada vez; en la última vez, aleta de secarse con el papel absorbente.

5) Adición de la conjugación de la enzima: Excepto control en blanco, añada la conjugación a cada pozo, 100ul/well, tapadera de la enzima con la hoja adhesiva, incuban en oscuridad en el ℃ 37 por 30 minutos. Deseche el líquido de los pozos y lave 3 veces descritas tan en el paso 4).

6). Adición de los substratos: según la cantidad necesaria, tome el mismo volumen del substrato A y del substrato B, mezcla ellos uniformemente antes de usar, después añada en todo el pozo, 100ul/well, tapadera con la hoja adhesiva, incuban en oscuridad en 37℃ por 10 minutos.

7). Pare la reacción: Añada 50ul paran la solución en todos los pozos para parar la reacción. Fije cero en el control en blanco, lea el valor del OD en el lector 450nm (630nm de ELISA como referencia).

6. Referencia

Juez de la validación

≤ negativo 0,20 del valor del OD del control (si más de 0,20, la prueba es inválido)

≥ positivo 0,50 del valor del OD del control (si menos de 0,50, la prueba es inválido)

7. Interpretación de los resultados

Valor de S/P= OD del valor del OD de la media de la muestra del control positivo

≥ 0,2 del valor de S/P: Positivo antibiody de Pleuropneumoniae del actinobacillus (APP) ApxIV;

Valor de S/P < 0="">

Limitación: Este equipo está para defender solamente, no como base para la diagnosis.

8. Notas

1) La placa de MicroWell quitada del ambiente refrigerado debe ser humedad equilibrada a secarse en la temperatura ambiente, después puede ser abierta. Ponga la placa inusitada trasera de MicroWell en bolso seco de la hoja y la selló en el ℃ 2~8.

2) Antes de añadir el reactivo, sacuda suavemente el frasco y la mezcla de cuentagotas incluso el reactivo.

3) Cuando la incubación, debe cubrir la placa con la hoja adhesiva, no repita utilizan la hoja adhesiva.

4) No mezcle los componentes y la instrucción del uso de diversos equipos

5) El equipo de la prueba y cualquier muestra se deben mirar como la fuente de infección para dirigir correctamente. Pare la solución es corrosivo, tenga cuidado de utilizar.

9. Almacenamiento y expirar fecha

Tienda en 2~8℃ en oscuridad, ningún congelado, fecha de vencimiento: 12 meses.

Biotecnología Co., Ltd de Shenzhen Lvshiyuan

Edificio de D, parque industrial biológico nacional de Marinelife, camino de No.2 Binhai, Dapeng, Shenzhen, 518120 China

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