LSY-10009 Kit de detección ELISA de residuos de sulfonamidas (SA) 0,4 ppb Kit de prueba de miel

Sulfonamidas de primavera verde(SAs)El kit ELISA(0,4 ppm)

No de catálogo LSY-10009

1Principio.

Este kit de ensayo se basa en el ensayo inmunológico enzimático competitivo para la detección de residuos de sulfonamidas.Las sulfonamidas de la muestra y los antígenos de acoplamiento pre-revestidos en las tiras de micro-pozo compiten por los anticuerpos anti-sulfonamidas.El valor de la densidad óptica (OD) de la muestra tiene una correlación negativa con las sulfonamidas en la muestra.Este valor se compara con la curva estándar y posteriormente se obtiene la concentración de sulfonamidas.

2Especificaciones técnicas

Sensibilidad:0.4Pb y p

Temperatura de la incubadora:25°C

Tiempo de la incubadora:30 minutos¿Qué quieres decir?15Min

Límites de detección

Tejido (método de alto límite de detección) 0,4 ppb

En el caso de los productos que no estén sujetos a restricciones de los derechos de aduana, el derecho de aduana se aplica a los productos que no estén sujetos a restricciones de aduana, incluidos los productos que estén sujetos a restricciones de aduana.

Suero y orina 1,6 ppb

Leche 8 ppb

Tasa de reacciones cruzadas

Sulfamerazina (SM)₁) 100%

Sulfadiazina (SD o SDZ) 130,2%

Sulfamonometoxina (SMM) 181,8%

Sulfametoxazol (SMZ)..... 86,6%

Sulfafurazol (SIZ) 76,5%

Sulfatiazol (ST) 103,3%

Sulfaquinoxalina ((SQX) 59,4%

Sulfametoxipiridazina (SMP) 68,6%

Sulfaclozina (Esb3)... 72,1%

Sulfacloropiridazina (SCPA) 49,6%

Sulfametoxidiazina (SMD) 194,8%

Sulfanetasaína (SM2) 79,3%

Sulfisomidina (SM2′)........................................................... El contenido de sulfisomidina (SM2′) en el contenido de sulfisomidina en el contenido de sulfisomidina en el contenido de sulfisomidina en el contenido de sulfisomidina en el contenido de sulfisomidina en el contenido de sulfisomidina en el contenido de sulfisomidina en el contenido de sulfisomidina en el contenido de sulfisomidina en el contenido de sulfisomidina en el contenido de sulfisomidina en el contenido de sulfisomidina en el contenido de sulfisomidina en el contenido de sulfisomidina en el contenido de sulfisomidina en el contenido de sulfisomidina

Sulfadimetoxina (SDM) 140,8%

Sulfadoxina (SDM ′)... 132,1%

Sulfadimoxina (SDM2)... 144,7%

Ftalilsulfatiazol(PST) 73,9%

Sulfabenzoyl (SML) 104%

Sulfamidina (SG) 0,1%

Conclusión extraída de la tasa de reacción cruzada: Este kit puede utilizarse para la prueba de sulfonamidas, satisfaciendo totalmente la demanda nacional de pruebas de sulfonamidas.

Tasa de recuperación

Tejido, orina, leche 85±25%

Cariño, suero 80±23%

3. Componentes

4- Materiales requeridos pero no proporcionados

1) elEquipamiento:Lector de microplacas, impresora, homogeneizador, dispositivo de secado de nitrógeno, votex, centrífuga, pipetas de medición, balanza (con sensibilidad recíproca de 0,01 g)

2) elLos micropipetadores:de un solo canal de 20 a 200 μL, de 100 a 1000 μL y de varios canales de 30 a 300 μL;

3) elLos reactivos:Acetonitril (CH)₃No incluye el aceto de etilo, el N-hexano, el Na₂HPO₄·12H₂O, NaH₂Oficina de trabajo₄·2H₂O, K₂HPO₄·3H₂O, cloruro de metileno_.

5Pre-tratamiento de la muestra

Instrucciones(Los siguientes puntos deben tratarse antes del pretratamiento)

1) Solo se pueden utilizar las puntas desechables para los experimentos y las puntas deben cambiarse cuando se utilizan para absorber diferentes reactivos;

2) Antes del experimento, cada utensilio experimental debe estar limpio y, si es necesario, debe volver a limpiarse, a fin de evitar la contaminación que interfiera con los resultados experimentales.

Preparación de la solución antes del pretratamiento de la muestra:

1) 0,1 M K₂HPO₄Solución: Pesar 11,4 g K₂HPO₄·3H₂O, se disuelve con 500 ml de agua desionizada.

2) 0,02 M PB de amortiguador: disolver 5,16 g de Na₂HPO₄·12H₂O y 0,87 g de NaH₂Oficina de trabajo₄·2H₂O en el agua desionizada a 1L.

3) Acetonitrilo (CH)₃CN) - Solución de mezcla de cloruro de metileno

V._Acetonitril- ¿Qué quieres?_{Cloruro de metileno}=1, 4. ¿ Qué?

4) La solución de redisolución concentrada de 20 × se diluye con agua desionizada a 1:19 (1 parte de solución de redisolución concentrada + 19 partes de agua desionizada).

5.1Tejido

A. Método de alto límite de detección

Método uno

1) Se pesan 2,0 ± 0,05 g de la muestra de tejido homogeneizada en un tubo centrífugo de 50 ml.

2) Añadir 8 ml de acetonitrilo (CH)₃CN) - Solución de mezcla de cloruro de metileno, agitada durante 2 min, centrifugada a una temperatura superior a 4000 r/min a 15 °C durante 10 min

3) Tomar 4 ml de la fase orgánica clara (capa superior) en un recipiente seco, soplar para secar con nitrógeno o aire completamente por evaporación rotativa a 50-60 °C

4) Se disuelven los residuos secos en 1 ml de la solución redisolvente diluida, se añade 1 ml de N-hexano, se agita vigorosamente durante 30 segundos; se centrifugan a una temperatura superior a 4000 r/min a 15 °C durante 5 min.

5) Se retira la capa superior y se toma 50 μl de solución de capa inferior para su posterior análisis.

 Doble de dilución de la muestra:1

Método dos

1) Se pesan 3 ± 0,05 g de la muestra homogeneizada, se coloca en un tubo centrífugo, se añade 3 ml de tampón PB de 0,02 M, se agita adecuadamente y luego se añaden 4 ml de acetato de etilo y 2 ml de acetonitrilo (CH)₃CN), agitar adecuadamente durante 10 minutos, centrifugar a una velocidad superior a 4000 r/min a 15 °C durante 10 minutos;

2) Transfiere 2 ml de supernatante (aproximadamente 1 g de muestra) a un nuevo tubo centrífugo, sopla para secar con nitrógeno o aire completamente por evaporación rotativa a 50-60 °C

3) Añadir 1 ml de N-hexano para disolver los residuos secos, luego añadir 1 ml de la solución de redisolución diluida, agitar fuertemente durante 1 min. Centrifugar a 4000 r/min a temperatura ambiente durante 5 min.quitar la capa superior

4) Se toman 50 μL de solución de capa baja para su posterior análisis.

Doble de dilución de la muestra:1

5.2 Suero

1) Colocar la muestra de suero a temperatura ambiente durante 30 min, centrifugar a una temperatura superior a 4000 r/min a 10 °C durante 10 min, separar el suero o filtrar el suero

2) Tomar 1 ml de suero y añadir 3 ml de tampón PB de 0,02 M. Mezclar durante 30 s.

3) Tomar 50 μL para su posterior análisis.

Doble de dilución de la muestra:4

5.3- ¿ Qué quieres decir?

1Pesar 2,0 ± 0,05 g de miel en un tubo centrífugo de 50 ml y añadir 2 ml de 0,1 M K.₂HPO₄Solución, vórtice y agitación durante 2 min.

2Se añaden 8 ml de acetato de etilo, se agita durante 3 minutos, se centrifugan a una velocidad superior a 4000 r/min a 15 °C durante 10 minutos;

3Se toman 4 ml de supernatante, se sopla para secar con nitrógeno a 56 °C, se añade 1 ml de la solución redisolvente diluida para disolver, se hace un vórtice y se agita durante 1 minuto.

4Tomar 50 μL para su análisis.

Doble de dilución de la muestra: 1

5.4Hidratante

1Añadir 3 ml de tampón PB de 0,02 M y 1 ml de la muestra de orina clara centrifugada, mezclar adecuadamente durante 30 segundos.

2Tomar 50 μL para su análisis.

Doble de dilución de la muestra: 4

5.5Leche

1Tomar 1 ml de leche, añadir 0,02 M PB de amortiguador, diluir a 1:19 ((V/V) (20 μL de leche + 380 μL de 0,02 M PB de amortiguador), mezclar durante 30 segundos.

2Tomar 50 μL para su análisis.

Doble de dilución de la muestra: 20

6Procedimientos de ELISA

6.1 Instrucciones

1. Colocar todos los reactivos y las tiras de micro-pozo a temperatura ambiente (20-25 °C) antes de su uso;

2. Todos los reactivos se devuelven a 2-8 °C inmediatamente después de su uso;

3La reproductibilidad del análisis ELISA depende en gran medida de la consistencia del lavado de platos.

4Para la incubación a temperaturas constantes, todas las muestras y reactivos deben evitar la exposición a la luz, y cada microplaca debe sellarse con la membrana de cubierta.

6.2 Procedimientos de funcionamiento

1. Retirar todos los reactivos necesarios y colocarlos a temperatura ambiente (20-25 °C) durante al menos 30 minutos. Tenga en cuenta que cada reactivo debe agitarse para mezclarse uniformemente antes de su uso.

2. tomar las tiras de micro-pozo necesarias y los marcos de las placas. volver a sellar la microplaca no utilizada, almacenada a 2- 8 °C;

3. Preparación de la solución: diluir 40 ml del tampón de lavado concentrado de 20 × con agua desionizada hasta 800 ml para su uso;

4. Numeración: numeración de los micro pozos de acuerdo con las muestras y la solución estándar; cada muestra y solución estándar deben realizarse en duplicado; registrar sus posiciones;

5. añadir 50 μL de la muestra o solución estándar a los pozos duplicados separados, añadir 50 μL de enzima conjugada, y luego añadir 50 μL de la solución de trabajo de anticuerpos en cada pozos. Mezclar agitando suavemente,sellar la microplaca con la membrana de cubierta,y incubar a los 25 años°Cpara30 minutos;

6. Lavar la microplaca con el amortiguador de lavado a 250 μl/pozo durante cuatro o cinco veces.seco con papel absorbente (si hay burbujas después de golpear, cortarlos con las puntas limpias);

7. Coloración: añadir 50 μL de la solución de sustrato A y 50 μL de la solución de B en cada pozo. Mezclar agitando suavemente.y incubar a los 25 años°Cpara15Min en la oscuridad para colorear;

8. Determinación: añadir 50 μL de solución de parada en cada pozo. Mezclar agitando suavemente. Establecer la longitud de onda del lector de microplacas en 450 nm para determinar el valor de OD.(se recomienda leer el valor de OD en la longitud de onda dual 450/630 nm en un plazo de 5 min).

7. Juicio del resultado

Hay dos métodos para juzgar los resultados; el primero es el juicio aproximado, mientras que el segundo es la determinación cuantitativa.Tenga en cuenta que el valor de la DO de la muestra tiene una correlación negativa con el contenido de sulfonamidas en la muestra..

7.1 Determinación cualitativa

El rango de concentración (ng/ml) obtenido por la comparación del valor medio de la DO de la muestra con el de la solución estándar, suponiendo que el valor de la DO de la muestraI sea 0.3, y el de la muestra II es 1.0, el valor OD de las soluciones estándar es: 2.243 para 0ppb, 1.816 para 0.4ppb, 1.415 para 0.8ppb, 0.74 para 1.6ppb, 0.313 para 3.2ppb, 0.155 para 6.4ppb,En consecuencia, el rango de concentración de la muestraI es de 3.2ppb a 6.4ppb, y el de la muestra II es de 0.8ppb a 1.6ppb. (multiplicado por el doble de dilución correspondiente)

7.2 Determinación cuantitativa

Los valores medios de los valores de absorbancia son equivalentes al porcentaje del valor medio de OD (B) de la muestra y de la solución estándar dividido por el valor de OD (B)₀) de la primera solución estándar (0 estándar) y posteriormente multiplicado por 100%, es decir,

B­el valor medio de OD (dobles pozos) de la muestra o de la solución estándar

B. El trabajo₀¢el valor medio de la DO de la solución estándar de 0 ng/mL

Dibuje la curva estándar con los porcentajes de absorción de las soluciones estándar y los valores del semilogaritmo de las soluciones estándar de sulfonamidas (ng/mL) como eje Y y eje X, respectivamente.Se leerá la concentración correspondiente de la muestra a partir de la curva estándar incorporando su porcentaje de absorción en la curva estándarEl valor resultante se multiplica posteriormente por el doble de dilución correspondiente, obteniendo finalmente la concentración de sulfonamidas en la muestra.

El uso del software de análisis profesional de este kit será más conveniente para el análisis preciso y rápido de una gran cantidad de muestras.

7.3 Tel individuoLas demás sustancias químicaselresultado Calculadométodo iónico

Los resultados multiplican la tasa de reactividad cruzada

8Las precauciones

1La temperatura ambiente inferior a 25 °C o la temperatura de los reactivos y de las muestras que no vuelvan a la temperatura ambiente (20-25 °C) darán lugar a un valor de OD estándar inferior.

2La sequedad de la microplaca en el proceso de lavado se verá acompañada por situaciones como las curvas estándar no lineales y la reproductibilidad indeseable.Así que continúa con el siguiente paso inmediatamente después de lavar.

3Mezclar uniformemente, de lo contrario habrá la reproductibilidad indeseable.

4La solución de parada es la solución de ácido sulfúrico 2 M, evite el contacto con la piel.

5No utilice el kit después de su fecha de caducidad. El uso de reactivos diluidos o adulterados de los kits dará lugar a cambios en la sensibilidad y los valores de detección de la dosis.No se intercambien los reactivos de los kits de diferentes números de lotes para su uso.

6. Coloque la microplaca no utilizada en una bolsa de sellado automático para volver a sellarla. La sustancia estándar y la primera de color incoloro son sensibles a la luz y, por lo tanto, no pueden exponerse directamente a la luz.

7. Desechar la solución de coloración con cualquier color que indique la degeneración de esta solución. El valor de detección de la solución estándar 0 es inferior a 0,5 (A450 nm < 0.5) indica su degeneración.

8La temperatura de reacción óptima es de 25 °C, y temperaturas demasiado altas o demasiado bajas darán lugar a cambios en la sensibilidad de detección y en los valores de OD.

9. Almacenamiento y fecha de caducidad

El almacenamiento:almacenar a 2-8 °C, no congelado.

Fecha de caducidad:1 año; la fecha de producción está en la caja.

 Nota: Si el envase de microplacas Vacuum tiene fugas, sigue siendo válido para su uso, no afecte al resultado del ensayo, sea relajado para su uso.

La empresa de biotecnología Shenzhen Lvshiyuan Co., Ltd.

D Edificio, Parque industrial biológico nacional de la vida marina, calle Binhai No. 2, Dapeng, Shenzhen, China, 518120

Tel. 86-755-28438788 El teléfono está en el teléfono.

Por fax 86-755-28938800

El correo electrónico:Información sobre las medidas de seguridad   

La Comisión ha adoptado una decisión sobre la aplicación de la presente Decisión.