LSY-10053 Kit de ensayo ELISA de tilmicosina kit de inmunoensayo enzimático competitivo para 96 pozos cuantitativos por kit

Tilimicosina Las pruebas de ELISAPruebaelEs el

No de catálogo LSY-10007

1Principio.

Este kit de ensayo se basa en el ensayo inmunológico enzimático competitivo para la detección de tilmicosina en la muestra.La tilmicosina de la muestra y el antígeno de acoplamiento pre-revestido en las franjas de micro-pozo compiten por el anticuerpo anti-tilmicosina.El valor de la densidad óptica (OD) de la muestra tiene una correlación negativa con la tilmicosina que contiene.Este valor se compara con la curva estándar y posteriormente se obtiene la concentración de tilmicosina..

2- ¿ Qué?especificaciones técnicas

Sensibilidad: 0.5Pb y p

Temperatura de incubación: 25°C

Tiempo de incubación:  20 minutos¿Qué quieres decir?10Min

Dlímite de acción:

Carne de cerdo, pollo 2 ppm

RRecuperaciónel tipo

Pollo y cerdo 90±30%

Cruzado-Tasa de reacción:

Tilmicosina 100%

3.Componentes

4- Materiales requeridos pero no proporcionados

1) elEquipamiento:Lector de microplacas, homogeneizador, dispositivo de secado de nitrógeno, vórtice, centrífuga, pipetas de medición y balanza (con una sensibilidad recíproca de 0,01 g), incubadora, impresora.

2) elLas demás especiesS: elde un solo canal de 20 a 200 μL, de 100 a 1000 μL y de varios canales de 30 a 300 μl.

3) elRAgenteel:El HCl, el NaOH.

5- ¿ Qué?muy grandeptratamiento de nuevo

Instrucciones

Antes del pretratamiento de cualquier tipo de muestra, se deben examinar los siguientes puntos:

1) Solo se pueden utilizar las puntas desechables para los experimentos y las puntas deben cambiarse cuando se utilizan para absorber diferentes reactivos;

2) Antes del experimento, cada equipo experimental debe comprobarse su limpieza y, en caso necesario, debe volver a limpiarse.para evitar la contaminación que interfiera con los resultados experimentales.

El SPreparación de la soluciónantes de la muestraptratamiento de nuevo

1) 0.2M HCl: tomar 17.2ml de HCl, añadir agua desionizada a 1L.

2) 1M NaOH: tomar 4g NaOH, añadir agua desionizada a 100ml.

3) Solución de extracto de muestra: la solución de extracto de muestra 5 × se diluye con agua desionizada a 1:4.

5.1 Pollo y cerdo

1Se toman 2 ± 0,05 g de la muestra homogeneizada en un tubo centrífugo de 50 ml, se añade 3 ml de 0,2 M HCl, se agita durante 3 minutos.

2. añadir 600ul de 1M NaOH y 2,4 ml de solución de extracto de muestra, agitar durante 3 min, centrifugar a una temperatura superior a 4000 r/min a 20°C durante 10 min.

3. Se tomarán 50 μL del líquido de la capa superior para su análisis ((nota: si hay una capa de grasa después de la centrifugadora, primero se desechará la capa de grasa o una capa de grasa separada para tomar el líquido claro para el ensayo).

Doble de dilución de la muestra:4

6Procedimientos de ELISA

6.1Instrucciones

1 Antes de su uso, llevar todos los reactivos y las tiras de micro-pozo a temperatura ambiente (20-25 °C);

2 Devolver todos los reactivos a 2-8 °C inmediatamente después de su uso.

3 La reproducibilidad del análisis ELISA depende en gran medida de la consistencia del lavado de platos.

Para la incubación a temperaturas constantes, todas las muestras y reactivos deben evitar la exposición a la luz y cada microplaca debe estar sellada por la membrana de cubierta.

6.2OperaciónProcedimientos

1. Retirar todos los reactivos necesarios del kit y colocarlos a temperatura ambiente (20-25 °C) durante al menos 30 minutos. Tenga en cuenta que cada reactivo debe agitarse para mezclarse uniformemente antes de su uso.

2- Tomar las tiras de micro-pozo necesarias y los marcos de las placas, sellar de nuevo la microplaca no utilizada, conservar a 2-8°C, no congelada.

3. Preparación de la solución: diluir 15 ml del tampón de lavado concentrado (20 × concentrado) con el agua desionizada a 1:19 (1 parte del tampón de lavado concentrado 20 × + 19 partes del agua desionizada),o prepararse según la cantidad necesaria.

4- Numeración: numeración de los micro pozos de acuerdo con las muestras y la solución estándar; cada muestra y solución estándar debe realizarse en duplicado, registrar sus posiciones.

5. añadir 50 μL de la muestra o solución estándar a pozos separados duplicados; luego añadir 50 μL de conjugado enzimático en cada pozos, por último añadir 50 μL de solución de trabajo de anticuerpos en cada pozos.Mezclar suavemente sacudiendo la placa manualmente, sellar la microplaca con la membrana de la cubierta, yIncubación en25 °C para20 minutos.

6. Verter el líquido, lavar la microplaca con el amortiguador de lavado diluido a 250 μL/pozo durante 4-5 veces.seco con papel absorbente (si hay burbujas después de golpear, cortarlos con las puntas limpias).

7. Coloración: añadir 50 μL de solución de sustrato A y luego 50 μL de solución de B en cada pozo. Mezclar suavemente agitando la placa manualmente yIncubación a los 25 años°Cpara 10 MinEn eloscuropara color.

8. Determinación: añadir 50 μL de la solución de parada en cada pozo. Mezclar suavemente sacudiendo la placa manualmente. Establecer la longitud de onda del lector de microplacas en 450nm para determinar el valor de OD.(se recomienda leer el valor OD a la doble longitud de onda 450/630 nm en un plazo de 5 min).

7. Rel uso el juicio

Hay dos métodos para juzgar los resultados; el primero es el juicio aproximado, mientras que el segundo es la determinación cuantitativa.Tenga en cuenta que el valor de la DO de la muestra tiene una correlación negativa con el contenido de tilmicosina..

7.1Determinante cualitativoEl

El intervalo de concentración (ng/ml) se puede obtener comparando el valor medio de la DO de la muestra con el de la solución estándar, suponiendo que el valor de la DO de la muestraI sea 0.2, y el de la muestra es 1.0, mientras que las de las soluciones estándar son las siguientes: 2,005 para 0ppb, 1,643 para 0,5ppb, 1,19 para 1,5ppb, 0,67 para 4,5ppb, 0,26 para 13,5ppb y 0,13 para 40,5ppb,En consecuencia, el rango de concentración de la muestra es 13.5 a 40.5 ppm, y el de la muestra II es de 1.5 a 4.5 ppm.

7.2 - ¿ Qué?determinación cuantitativa

Los valores medios de los valores de absorbancia obtenidos para el valor medio de OD (B) de la muestra y la solución estándar divididos por el valor de OD (B)₀) de la primera solución estándar (0 estándar) y posteriormente multiplicado por 100%, es decir,

B­el valor medio de OD de la muestra o de la solución estándar

B. El trabajo₀¢el valor medio de la DO de la solución estándar de 0 ng/ml

Dibuje la curva estándar con los porcentajes de absorción de la solución estándar y los valores del semilogaritmo de la solución estándar de tilmicosina (ng/mL) como eje Y y eje X, respectivamente.Se leerá la concentración correspondiente de la muestra a partir de la curva estándar incorporando su porcentaje de absorción en la curva estándarEl valor obtenido se multiplica posteriormente por el doble de dilución correspondiente, obteniendo así finalmente la concentración de tilmicosina en la muestra.

El uso del software de análisis profesional de este kit será más conveniente para el análisis preciso y rápido de una gran cantidad de muestras. (Por favor póngase en contacto con nosotros para este software).

8Las precauciones

1La temperatura ambiente inferior a 25 °C o la temperatura de los reactivos y de las muestras que no vuelvan a la temperatura ambiente (20-25 °C) darán lugar a un valor de OD estándar inferior.

2La sequedad de la microplaca en el proceso de lavado se verá acompañada por situaciones como las curvas estándar no lineales y la reproductibilidad indeseable.

3Mezclar todos los reactivos y mezclas de reacción de manera uniforme y lavar bien la microplaca, de lo contrario se producirá la reproducibilidad indeseable.

4La solución de parada es la solución de ácido sulfúrico 2 M, evitar el contacto con la piel.

5La sustancia estándar y la primera de color incoloro son sensibles a la luz y, por lo tanto, no pueden exponerse directamente a la luz.

6No utilice el kit después de su fecha de caducidad. El uso de reactivos diluidos o adulterados de los kits dará lugar a cambios en la sensibilidad y los valores de detección de la dosis.No se intercambien los reactivos de los kits de diferentes números de lotes para su uso.

7. Desechar la solución de coloración con cualquier color que indique la degeneración de esta solución.

8La temperatura de reacción óptima es de 25 °C, y temperaturas demasiado altas o demasiado bajas darán lugar a cambios en la sensibilidad de detección y en los valores de OD.

9. El Storage yfecha de caducidad

El Sel torage:almacenar a 2-8 °C, no congelado.

Fecha de caducidad:12 meses; la fecha de producción está en la caja.

Nota: Si el envase de microplacas Vacuum tiene fugas, sigue siendo válido para su uso, no afecte al resultado del ensayo, sea relajado para su uso.

La empresa de biotecnología Shenzhen Lvshiyuan Co., Ltd.

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Por fax 86-755-28938800

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