Seguridad de la leche de LSY-10070 Ivermectin ELISA Test Kit, detección ISO9001, ISO13485 de la seguridad de la carne

Ivermectin ELISA Test Kit

No. LSY-10070 del catálogo

1. Principio

Este equipo de la prueba se basa en el immunoensayo competitivo de la enzima para la detección de Ivermectin en la muestra. Los antígenos de acoplamiento se cubren primero en las rayas micro-bien. El Ivermectin en la muestra y los antígenos de acoplamiento cubiertos primero en las rayas micro-bien compiten para los anticuerpos antis-Ivermectin. Después de que la adición de la conjugación de la enzima, el substrato de TMB se añada para la coloración. El valor de la densidad óptica (OD) de la muestra tiene una correlación negativa con el Ivermectin en él. Este valor se compara a la curva estándar y la concentración de Ivermectin se obtiene posteriormente.

2. Especificaciones técnicas

Sensibilidad: 2ppb

Límite de detección

Tejido ........................................................................................... 16ppb

Leche líquida ..................................................................................... 20ppb

Nota: ppb= ng/ml o ng/g

Tarifa del reacción cruzado

Ivermectin ....................................................................................... 100%

Avermectin ...................................................................................... los 400%

Eprinomectin ..................................................................................... los 40%

Doramectin ........................................................................................ los 24%

Tarifa de recuperación

el 90±30%

Precisión: el coeficiente de variación del equipo es menos del 10%

3. Componentes

1. Tiras micro-bien: 12 tiras con 8 pozos desprendibles por cada uno
2. solución estándar 6× (1mL cada uno): 0ppb, 2ppb, 6ppb, 18ppb, 54ppb, 162ppb
3. 11X concentró la conjugación de la enzima (0,7 ml)
4. Dilución conyugal de la enzima (7 ml)
5. Substrato A (7 ml)
6. Substrato B (7 ml)
7. Pare la solución (7 ml)
8. 20× concentró el almacenador intermediario que se lavaba (30 ml)
9. Redisolviendo la solución (50 ml)
10. Solución del tratamiento de la muestra de tejido (10mL)

4. Materiales requeridos pero no proporcionados

1. Equipos: el lector del microplate (450nm, 630nm), impresora, homogeneizador, dispositivo de la nitrógeno-sequedad, vórtice, coctelera, amoladora, centrifugadora (4000r/min y arriba), midiendo mide con una pipeta, la balanza (una sensibilidad recíproca de 0,01 g), incubadora (25℃), contador de tiempo;
2. Micropipettors: µL 20-200 µL monocanal, 100-1000, y µl del ocho-canal 30~300;
3. Reactivo (AR): Metanol, agua desionizada

5. Tratamiento previo de la muestra

Instrucciones

Los puntos siguientes se deben ocupar antes del tratamiento previo de la clase de muestra:

1. Solamente las extremidades disponibles se pueden utilizar para los experimentos y las extremidades deben ser cambiadas cuando están utilizadas para absorber diversos reactivo;
2. Antes del experimento, cada equipo experimental debe ser limpio y se debe re-limpiar en caso de necesidad, para evitar la contaminación que interfiere con los resultados experimentales.

Preparación de la solución antes del tratamiento previo de la muestra:

Almacenador intermediario que se lava: 1 porción 20× concentró el almacenador intermediario que se lavaba + 19 porciones de agua desionizada.

5,1 tejido

1) Tome 2.0±0.05g homogeneizó la muestra de tejido en un tubo de centrífuga 50ml;

2) Añada 2ml el metanol, solución del tratamiento de la muestra de tejido 100ul por consiguiente, vórtice para 5min hasta la muestra de tejido separada;

3) Centrifugadora en 4000r/min en la temperatura ambiente (25±2℃) para 10min;

4) Tome el líquido claro de la para arriba-capa 200ul, añada 400ul que redisuelve la solución, el vórtice para 10S y la mezcla uniformemente;

5) Tome a 50 el µL para el análisis.

Doblez del dilución de la muestra: 6

5,2 leche

1) Recoja la muestra de la leche 1ml en un tubo de centrífuga 10ml;

2) Añada 3ml el metanol, vórtice para 1min;

3) Centrifugadora en 4000r/min en la temperatura ambiente (25±2℃) para 10min;

4) Tome el líquido de la para arriba-capa 200ul, añada 400ul que redisuelve la solución, el vórtice para 10S y la mezcla uniformemente;

5)Tome a 50 el µL para el análisis.

Doblez del dilución de la muestra: 10

6. Procedimientos de ELISA

Instrucciones

1. Traiga todos los reactivo y tiras micro-bien a la temperatura ambiente (℃ 20-25).

2. Vuelva todos los reactivo al ℃ 2-8 inmediatamente después del uso.

3. La reproductibilidad del análisis de ELISA, depende en gran parte de la consistencia del lavado de la placa. La operación correcta del lavado de la placa es el punto clave en los procedimientos de ELISA.

4. Para la incubación en las temperaturas constantes, todas las muestras y reactivo deben evitar la exposición luminosa, y cada microplate se debe sellar por la membrana de la cubierta.

Procedimientos de la operación

1. Saque todos los reactivo necesarios del equipo y del lugar en la temperatura ambiente (20 al ℃ 25) por lo menos 30 minutos. Observe que cada reactivo líquido se debe sacudir para mezclarse uniformemente antes de usar.
2. Tome las tiras y los marcos micro-bien requeridos de la placa. Reselló el microplate inusitado, almacenado en el ℃ 2-8, no congelado.
3. Enumeración: número los micro-pozos según muestras y la solución estándar; cada muestra y solución estándar se deben realizar dos veces; registre sus posiciones.
4. Preparación conyugal de la enzima: tome la conjugación concentrada 11X de la enzima de 1 porción, añada 10 porciones de dilución conyugal de la enzima, dilúyalas en el 1:10, consiga la conjugación lista para utilizar de la enzima.
5. Añada 50µL de la muestra o la solución estándar para separar pozos duplicados, entonces añade la conjugación de la enzima, µL 50 cada pozo. Mézclese suavemente sacudiendo la placa manualmente, el sello el microplate con la membrana de la cubierta, e incube en el ℃ 25 en la oscuridad por 30 minutos.
6. Vierta el líquido fuera de microwell, añada 250 µL/well del almacenador intermediario que se lava por 15-30 segundos, repita tres a cuatro veces, entonces aleta de secarse (si hay las burbujas después del aleteo, las corta con las extremidades limpias).
7. Coloración: añada el µL 50 del substrato A, después añada 50uL del substrato B en cada pozo. Mézclese suavemente sacudiendo la placa manualmente, e incube en el ℃ 25 por 15 minutos en la oscuridad para la coloración.
8. Determinación: añada 50 que el µL del para la solución en cada pozo. Mézclese suavemente sacudiendo la placa manualmente. Fije la longitud de onda del lector del microplate en 450 nanómetro para determinar el valor del OD (recomiende leer el valor del OD en la dual-longitud de onda 450/630 nanómetro en el plazo de 5 minutos).

7. Juicio del resultado

Determinación cuantitativa

Los valores medios de los valores de la absorción son equivalentes al porcentaje del valor medio del OD (b) de la muestra y de la solución estándar divididas por el valor del OD (B₀) de la primera solución estándar (0 estándares) y multiplicadas posteriormente antes de 100%, es decir,

Valor del OD de la media de B-the (pozos dobles) de la muestra o de la solución estándar

B₀ — el valor medio del OD de las 0 soluciones estándar de ng/mL

Dibuje la curva estándar con los porcentajes de la absorción de las soluciones estándar y los valores del semilogarithm de las soluciones estándar de Ivermectin (ng/mL) como la y y X-AXIS, respectivamente. Lea la concentración correspondiente de la muestra de la curva estándar incorporando su porcentaje de la absorción en la curva estándar. El valor resultante es multiplicado posteriormente por el doblez correspondiente del dilución, así finalmente obteniendo la concentración de Ivermectin en la muestra.

8.Precautions

1). La temperatura ambiente debajo del ℃ 20 o la temperatura los reactivo y de las muestras que son

no vuelto a la temperatura ambiente (℃ 20-25) llevará a un valor estándar más bajo del OD.

2). La sequedad del microplate en el proceso que se lava será acompañada por las situaciones

incluyendo las curvas estándar no lineales y la reproductibilidad indeseable; Continúe tan a siguiente

paso inmediatamente después del lavado.

3). Mézclese uniformemente antes de añadir cualesquiera reactivo.

4). La solución de la parada es la solución ácida sulfúrica de 2 M, evita entrar en contacto con con la piel.

5). No utilice el equipo que excede su fecha de vencimiento. El uso de reactivo diluidos o adulterados del

los equipos llevarán a los cambios en la sensibilidad y los valores de detección del OD. No intercambie

reactivo de los equipos de diversos números de lote a utilizar.

6). Almacenamiento: tienda en el ℃ 2-8, no congelado. Ponga el microplate inusitado en un bolso del auto-lacre a

reséllelo. La sustancia estándar y el color descolorido anteriores es sensibles a la luz, y así ellos

no puede ser expuesto directamente a la luz.

7). Deseche la solución de la coloración con cualquier color que indique la degeneración de esta solución.

El valor de detección (450/630nm) de las 0 soluciones estándar (0 ppb) de menos de 0,5 ((A450nm<0>

indica su degeneración.

8). Después de añadir el substrato, el tiempo de la coloración es 15min. Si el color es demasiado ligero, puede prolongar el tiempo a 20min (o más largo), pero no más allá de 30min; de otra manera, acorte el tiempo de reacción.

9). La temperatura óptima de la reacción es el ℃ 25, y las temperaturas demasiado altas o demasiado bajas resultarán adentro

los cambios en la sensibilidad de detección y valores del OD.

9. Fecha del almacenamiento y de vencimiento

Almacenamiento: tienda en el ℃ 2-8, no congelado.

Fecha de vencimiento: 12 meses; la fecha de la producción está en la caja.

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