LSY-10058 kanamicina ELISA Test Kit para la leche, cerdo, pollo

Kanamicina ELISA Test Kit

No. LSY-10058 del catálogo

1. Principio

Este equipo de la prueba se basa en el immunoensayo competitivo de la enzima para la detección de kanamicina en la muestra. Los antígenos de acoplamiento se cubren primero en las rayas micro-bien. La kanamicina en la muestra y los antígenos de acoplamiento cubiertos primero en las rayas micro-bien compiten para los anticuerpos de la anti-kanamicina. Después de que la adición de la conjugación de la enzima, el substrato de TMB se añada para la coloración. El valor de la densidad óptica (OD) de la muestra tiene una correlación negativa con la kanamicina en él. Este valor se compara a la curva estándar y la concentración de la kanamicina se obtiene posteriormente.

2. Especificaciones técnicas

Sensibilidad: 0,2 ppb

Temperatura de la incubadora: 25℃

Tiempo de la incubadora: minuto 20 ~ minuto10

Límite de detección

Leche líquida (método 2) sobre 10ppb

Cerdo, pollo sobre 6ppb

Leche líquida (método 1), miel, vacuna sobre 5ppb

Nota: ppb= ng/ml o ng/g

Tarifa del reacción cruzado

Kanamicina 100%

Espectinomicina, estreptomicina, Tilmicosin <0>

Tarifa de recuperación

el 90±30%

3. Componentes

• Tiras micro-bien: 12 tiras con 8 pozos desprendibles por cada uno
• solución estándar 6× (1mL cada uno): 0ppb, 0.2ppb, 0.6ppb, 1.8ppb, 5.4ppb, 16.2ppb
• Conjugación de la enzima (7 ml)
• Solución de funcionamiento del anticuerpo (7 ml)
• Substrato A (7 ml)
• Substrato B (7 ml)
• Pare la solución (7 ml)
• 20X concentró el almacenador intermediario que se lavaba (30 ml)
• 20X concentró el tejido que redisolvía la solución (10 ml)
• 10X concentró la miel que redisolvía la solución (10 ml) (de opcional)

4. Materiales requeridos pero no proporcionados

• Equipos: el lector del microplate (450nm, 630nm), impresora, homogeneizador, dispositivo de la nitrógeno-sequedad, vórtice, coctelera, centrifugadora (4000g y arriba), midiendo mide con una pipeta, la balanza (una sensibilidad recíproca de 0,01 g), incubadora (25℃), contador de tiempo;
• Micropipettors: µL 20-200 µL monocanal, 100-1000, y µl del ocho-canal 30~300;
• Reactivo (AR): NaOH, NaCl, KCl, KH₂ PO₄, Na₂ HPO₄₁₂▪ H₂ O (los reactivo antedichos están de grado analítico), agua desionizada.

5. Tratamiento previo de la muestra

Instrucciones

Los puntos siguientes se deben ocupar antes del tratamiento previo de la clase de muestra:

• Solamente las extremidades disponibles se pueden utilizar para los experimentos y las extremidades deben ser cambiadas cuando están utilizadas para absorber diversos reactivo;
• Antes del experimento, cada equipo experimental debe ser limpio y se debe re-limpiar en caso de necesidad, para evitar la contaminación que interfiere con los resultados experimentales.

Preparación de la solución antes del tratamiento previo de la muestra:

1) Tejido que redisuelve la solución: 1 porción de 20X concentró el tejido que redisolvía la solución, añade 19 porciones de agua desionizada, la mezcla uniformemente.

2) Miel que redisuelve la solución: 1 porción de 10X concentró la miel que redisolvía la solución, añade 9 porciones de agua desionizada, la mezcla uniformemente.

• Almacenador intermediario: solución de los 0.1M PBS (PH=10-11): pese 13.4g Na₂ HPO₄₁₂▪ H₂ O, 20g NaCl, 0.32g NaOH, 0.5g KH₂ PO₄, 0.5gKCl, añada el agua desionizada a 500ml.
• el 1M HCl: tome el ácido clorhídrico 1ml, añada 11ml desionizó el agua, la mezclan uniformemente.
• Almacenador intermediario que se lava: 1 porción 20× concentró el almacenador intermediario que se lavaba + 19 porciones de agua desionizada.

5,1 leche (método 1)

1) Tome la leche cruda recogida, deshielo y volver a la temperatura ambiente para 30min antedicho;

2) Las extremidades puestas en abajo-capa de leche cruda, sacan la muestra 1ml en el tubo de centrífuga 2ml (nota: no tome la crema de la para arriba-capa);

3) Añada el ácido clorhídrico de 50ul el 1M, sacuda fuertemente para 1min (o el vórtice para 30s);

4) Centrifugadora en sobre 4000 g en la temperatura ambiente para 10min;

5) Tome el líquido claro de la para arriba-capa 50ul en otro tubo de centrífuga (no tome la crema de la para arriba-capa), después añada el tejido 450ul que redisuelve la solución, sacuda fuertemente para 1min (o el vórtice para 30s);

6) Tome 50ul líquido para probar.

Doblez del dilución de la muestra: 10

5,2 leche (método 2)

1) Recoja a 50ul la muestra de la leche líquida, añada el tejido 1950ul que redisuelve la solución, vórtice para 1min, mézclelo uniformemente;

2) Tome a 50 el µL para el análisis.

Doblez del dilución de la muestra: 20

5,3 tejido (pollo, cerdo)

1) Tome 1.0±0.05g homogeneizó la muestra de tejido en el tubo de centrífuga del poliestireno 50ml;

2) Añada el almacenador intermediario 3ml: la solución de los 0.1M PBS (PH=10-11), sacude fuertemente para 5min, entonces lo puso en el baño de agua 60℃ para 60min, después toma hacia fuera y lo centrifuga en arriba 4000 r/min en la temperatura ambiente (20 - el ℃ 25) para 10min;

3) Tome el líquido claro de la para arriba-capa 100ul, añada el tejido 400ul que redisuelve la solución, vórtice para 20S;

5) Tome a 50 el µL para el análisis.

Doblez del dilución de la muestra: 15

5,4 miel

1) Recoja la muestra de la miel 1.0±0.05g en el tubo de centrífuga del poliestireno 50ml;

2) Añada el agua desionizada 2ml, sacudida fuertemente para 2minl (o el vórtice para 1min)

3) Tome el líquido claro de la para arriba-capa 100ul, añada la miel 400ul que redisuelve la solución, vórtice para 30S;

4) Tome a 50 el µL para el análisis.

Doblez del dilución de la muestra: 10