Anticuerpo del virus de la peste porcina africana LSY-30048 que bloquea el ASF del equipo de ELISA (b-ELISA)

Anticuerpo del virus de la peste porcina africana que bloquea el equipo de ELISA (b-ELISA)

No. LSY-30048 del catálogo

1. Escrito y uso

La peste porcina africana (ASF) es una infección severa, aguda, altamente contagiosa de los cerdos causados por el virus de la peste porcina africana (ASFV). El ASF es caracterizado por alta fiebre, la cianosis de la piel, la sangría severa de órganos internos, desordenes respiratorios, síntomas neurológicos, el curso corto de la enfermedad y la alta mortalidad. Este equipo basado en el anticuerpo monoclonal de la expresión y de la especificidad del antígeno VP72 (McAb), adoptando bloqueando el análisis enzima-ligado del inmunosorbente (b-ELISA), equipado de una gama completa de reactivo y de materiales de diagnóstico, una caja puede detectar 92 pedazos de suero (o parcial) según la circunstancia, se puede utilizar en la detección del anticuerpo de la peste porcina africana, la alta sensibilidad, la especificidad fuerte, la repetibilidad, y las características del equipo sí mismo sin contagiosidad.

Bloqueo del análisis enzima-ligado del inmunosorbente (b ELISA) para la detección específica de los anticuerpos del virus de la peste porcina africana en muestras del suero de los cerdos.

2. Principio

Los anticuerpos específicos en el suero que se probará bloquean el atascamiento de ASFV y de McAb. Añada el suero que se probará en el agujero bien de la placa de la enzima 96 cubierto con el antígeno recombinante de la proteína de ASFV. Si hay anticuerpo específico de ASFV en el suero que se probará, atará con el antígeno revestido específico. Después de bloquear, añada la reacción obligatoria del anticuerpo monoclonal y del antígeno enzima-específicos. El anticuerpo monoclonal enzima-específico desatado será quitado y ningún color aparecerá después de añadir el substrato. Por el contrario, si no hay anticuerpo específico de ASFV en el suero que se probará, allí será desarrollo del color después de que se añada el substrato. El valor del OD del reactivo fue medido por el instrumento de etiquetado de la enzima, la tarifa de bloqueo era calculada, y los resultados de la prueba fueron determinados.

componentes del equipo 3.The

4. preparación

1) Traiga los reactivo de ELISA al minuto 30 de la temperatura ambiente (℃ 20-25) por lo menos para conseguir los mejores resultados. Microplate debe volver a la temperatura ambiente y seco antes de paquete abierto.

2) Muestree diluído: Muestra diluída con la solución del diluyente de la muestra en 10 veces. (solución del diluyente del suero 10ul + de la muestra 90ul), la muestra diluida necesita mezclarse uniformemente para conseguir mejores resultados. El control negativo y positivo no necesita diluir, la añade directamente para probar.

3) Preparación del almacenador intermediario que se lava: Diluya el almacenador intermediario del lavado 10×concentrated con agua desionizada en 10 veces. (Por ejemplo: el almacenador intermediario del lavado de 1ml 20×concentrated + el agua desionizada 9ml) hacen los cristales disolvieron totalmente antes de usar. El almacenador intermediario que se lava diluido puede almacenar por 7-10 días en 2~8℃.

5. procedimiento

• Saque las placas revestidas (puede ser separado) y registrar la posición de la muestra respecto a una hoja de trabajo. Fijado 2 pozos para el suero negativo del control, añada el suero negativo no diluido del control, 2 pozos para el suero positivo del control, añaden el suero positivo no diluido del control, 100μL/well. Otros son pozos de la muestra, añaden la muestra diluida, 100μL cada uno (la prueba sola-bien y doble-bien está MUY BIEN).
• Mézclese suavemente, cubra e incube en la caja mojada de 37℃ para 60 mínimos.
• Quite la hoja adhesiva. Vierta el líquido fuera de los pozos, añada el almacenador intermediario que se lava diluido en cada pozo completamente, después vierta directamente. Repita 6 veces, en la palmadita de la última vez de secarse en el papel absorbente.
• Añada la conjugación monoclonal de la enzima de 100μL ASFV en cada pozo, mézclela suavemente.
• Tapadera con la hoja adhesiva. Incube en la caja mojada de 37 ℃ para 45 mínimos.
• Repita el paso 3 (lavado).
• Añada el substrato 100ul en cada pozo, mézclese correctamente, incube para el minuto 10 en el ℃ 37 en la oscuridad.
• Añada la solución 50μL en cada pozo, mezcla de la parada suavemente y determinar el resultado.
• Mida el valor del OD de cada pozo con un fotómetro en la longitud 450nm/630nm de la dual-onda.

6. resultados

Para que el análisis sea válido, el valor del OD de los pozos negativos del control debe ser mayor o igual 1,0, y el valor del OD de los pozos positivos del control es menos de 0,5. Si no la prueba es inválida, prueba de la necesidad otra vez.

Calcule la tarifa de bloqueo (%) como siguiente:

Tarifa de bloqueo (%) = [(valor medio del OD del valor negativo del OD de la media del control de la muestra) valor de /Average OD del control negativo] el x100%

Si tarifa de bloqueo (%) el ≥50%: es positivo del anticuerpo de ASFV;

Tarifa de bloqueo (%)<45>

tarifa 45%≤Blocking (%)<50>

7. precauciones y advertencias para los usuarios

1). Este equipo es un producto experimental. Trate el número por lotes y la fecha de vencimiento considera la etiqueta en la caja y la instrucción, no utiliza el equipo anticuado.

2). El equipo debe almacenar en 2~8℃, la vida útil es 12 meses;

3). Lea el manual cuidadosamente antes de usar.

4). Todos los componentes en el equipo necesitan poner en la temperatura ambiente para 30min antes de usar.

5). La placa revestida es una placa desmontable de ELISA, que se puede desmontar y utilizar por muchas veces. La tira revestida restante será sellada para evitar la humedad.

6). Después de que se añada la muestra, debe ser mezclada uniformemente. Cada muestra debe utilizar una nueva extremidad de la pipeta para evitar la contaminación cruzada.

7). Lavado a fondo.

8). El tiempo de detección será controlado estrictamente y cada paso de la operación será compacto.

9). Después de la terminación, el valor del OD será medido dentro de 30min para evitar el cambio del color.

10). El suero que se probará se puede diluir un día antes del experimento y colocó durante la noche en 4℃.

11). No exponga el substrato a la luz fuerte y no evite el contacto con el oxidante.

Especificaciones: 96 pozos.

Fecha de vencimiento: 12 meses.

Almacenamiento: Tienda en 2~8℃, en la oscuridad, congelada no.

Fecha de producción: En el externo-embalaje del equipo de la prueba, utilice el equipo durante fecha de vencimiento.